[发明专利]一种复合微生物制剂及其在防治疫霉中的用途

权利要求书

1.一种复合微生物制剂在防治辣椒疫霉中的应用，其特征在于，所述复合微生物制剂按照如下工艺制备而得：将康氏木霉（Trichoderma-Koningii）-丝孢酵母（Trichosporonsp.）混合发酵液、沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）发酵液、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）发酵液按照5-8:2-3:2-3的体积比混合均匀，然后真空冷冻干燥制得菌粉，即得；

所述康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液按照如下步骤制备而得：

1）将丝孢酵母划线接种在YPDA培养基上培养，得到单菌落；挑取单菌落接种到YPD液体培养基上培养，30℃培养24h，得到丝孢酵母种子液，待用；

2）将康氏木霉划线接种在PDA培养基上培养，得到单菌落；挑取单菌落接种到PDA液体培养基上培养，30℃、200rpm摇床培养36h，得到康氏木霉种子液，待用；

3）先将康氏木霉种子液按照10%的接种量接入到发酵培养基中，30℃培养6小时，然后将丝孢酵母种子液按照5%的接种量接入到发酵培养基，继续以30℃培养18小时，得到康氏木霉-丝孢酵母混合发酵液；

所述沼泽红假单胞菌发酵液按照如下步骤制备而得：

将沼泽红假单胞菌在LB平板上划线培养，得到单菌落；挑取单菌落接入种子培养基上培养至对数生长期，培养条件为：30-32℃，光照3000-4000Lux，制成种子液；然后按照10%的接种量接入到发酵培养基中，30-32℃培养24h，得到沼泽红假单胞菌发酵液；

所述枯草芽孢杆菌发酵液按照如下步骤制备而得：

将枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上划线培养，得到单菌落；挑取单菌落接入种子培养基上，30℃、200rpm摇床培养至对数生长期，制成种子液；然后按照8%的接种量接入到发酵培养基中，30℃培养36h，得到枯草芽孢杆菌发酵液；

所述康氏木霉为康氏木霉ATCC66766，所述丝孢酵母为丝孢酵母ATCC201110，所述沼泽红假单胞菌为沼泽红假单胞菌ATCC17001，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ATCC6633。