[发明专利]一种舒肝和胃止痛中药的HPLC指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种中药新药指纹图谱的检测方法，具体涉及一种舒肝和胃止痛中药的HPLC指纹图谱检测方法。本发明针对舒肝和胃止痛中药的指纹图谱，对色谱柱、流动相、检测波长、梯度洗脱程序等条件进行了优化，建立了液相指纹图谱测定条件并进行了方法学考察，根据多批次中试样品建立了舒肝和胃止痛中药的标准指纹图谱，该图谱共确定了13个共有峰，并对相关共有峰进行了药材归属和成分指认。本发明能更加全面地表征舒肝和胃止痛中药的质量，更有利于指导本品生产和临床用药，确保临床用药的安全性和有效性。本发明方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。

技术领域

本发明属于中药检测领域，涉及一种舒肝和胃止痛中药的HPLC指纹图谱检测方法。

背景技术

舒肝和胃止痛中药为健民药业集团股份有限公司正在研发的中药六类新药，其处方由枳壳、紫苏梗、虎杖、陈皮、香附、黄连、制吴茱萸、浙贝母、海螵蛸、甘草十味药材组成，CN105770376A的专利文献已公开了本品的处方。该中药经现代工艺研制而成，具有舒肝和胃止痛的功效，用于非糜烂性胃食管返流病肝胃不和证，症见烧心，胸骨后疼痛，嗳气、嘈杂、胃痛或胃胀、胸胁胀满或胀痛等。

该中药现有的质量检测方法主要通过对其中一两种成分的含量测定结合其它药材的薄层定性鉴别来进行，需要制备不同的检测样品和使用不同的仪器，具有检测周期长，费用高等缺点，更为重要的是，该方法不可能对处方中的十味药材均进行检测，从而为中药掺假提供了可乘之机。

指纹图谱作为从整体上对中药进行质量控制的一种技术，自2010版开始已载入中国药典，其优势比起单一组分甚至多组分定性定量更加明显，特别是针对药物来源广、成分复杂、物质基础不明确的中药复方制剂，指纹图谱可实现对中药内在质量的综合评价和对其整体物质的有效控制，是目前中药及其制剂质量控制的最有效手段之一。为了更好的监控和评价本品质量，指导后续的规范化生产，本发明提供一种舒肝和胃止痛中药的液相指纹图谱的分析方法。

发明内容

本发明的目的在于建立一种舒肝和胃止痛中药的HPLC指纹图谱检测分析方法，从而达到从整体上全方位表征和控制本品质量，更好地指导工业化生产和临床用药。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种舒肝和胃止痛中药的HPLC指纹图谱检测方法，所述舒肝和胃止痛中药由枳壳、紫苏梗、虎杖、陈皮、香附、黄连、吴茱萸、浙贝母、海螵蛸、甘草共十味药材组成，该检测方法包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：将待测中药研细后用有机溶剂提取，提取液用微孔滤膜过滤，取续滤液，即为供试品溶液；

(2)精密吸取供试品溶液5-20μl，上高效液相色谱仪进行检测，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为280-290nm，所述高效液相色谱仪的固定相为C₁₈色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.05-0.5％磷酸水溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～40℃；

(3)记录供试品溶液0～76min的色谱图，利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液的色谱图进行数据导入、多点矫正和数据匹配，即得指纹图谱并进行相似度分析。

优选地，所述有机溶剂为正丁醇。

优选地，所述微孔滤膜的孔径为0.45μm。

优选地，所述紫外检测器的设定检测波长为284nm。

优选地，所述流动相B为0.1％磷酸水溶液。

优选地，所述柱温为30℃。

优选地，所述梯度洗脱的程序如下：