[发明专利]一种链霉菌来源的新型调控因子及其本源和异源表达工程菌株构建与应用

权利要求书

1.一种链霉菌来源的调控因子的编码基因，其特征在于：所述编码基因命名为med-ORF10，其核苷酸序列如SEQ No.1所示；该基因序列来源于链霉菌AM-7161(Streptomycessp.AM-7161)，其核苷酸序列由441个碱基组成，编码一个调控因子。

2.一种链霉菌来源的调控因子，其特征在于：所述调控因子命名为Med-ORF10，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；该序列来源于链霉菌AM-7161(Streptomyces sp.AM-7161)，其氨基酸序列由146个氨基酸组成，编码的蛋白含有核转运因子NTF-2(nuclear transportorfactor-2)结构域，无其它结构域。

3.一种用于检测对抗生素美达霉素合成产量有影响的工程菌，其特征在于：所述工程菌是一种med-ORF10缺失工程菌，该菌命名为Streptomyces coelicolor/pAY64，是在来源于Streptomyces sp.AM-7161的美达霉素基因簇基础上缺失med-ORF10后，通过种间接合转移进入Streptomyces coelicolor CH999细胞内获得；其基因型为Streptomycescoelicolor CH999，pTST59.1携带med-ORF10缺失的美达霉素基因簇导入CH999、卡那霉素抗性(kanamycin resistance)、阿泊拉霉素抗性(apramycin resistance)。

4.一种med-ORF10的异源表达工程菌，其特征在于：所述工程菌命名为StreptomycescoelicolorΔVI-ORFA/Med-ORF10，是利用Streptomyces coelicolorΔVI-ORFA为出发菌株，通过种间接合转移在其细胞内导入由pIJ8600携带med-ORF10整合插入基因组获得；其基因型为Streptomyces coelicolorΔVI-ORFA，actVI-ORFA缺失、pIJ8600携带Med-ORF10整合插入ΔVI-ORFA、阿泊拉霉素抗性(apramycin resistance)、硫链丝菌素诱导型启动子。

5.一种med-ORF10的本源表达工程菌，其特征在于：所述工程菌命名为Streptomycessp.AM-7161/Med-ORF10，是利用Streptomyces sp.AM-7161为出发菌株，通过种间接合转移在其细胞内导入由pWHM4*携带med-ORF10基因获得；其基因型为Streptomyces sp.AM-7161，pWHM4*携带med-ORF10导入AM-7161、硫链丝菌素抗性(thiostrepton resistance)、组成型启动子P_ermE。

6.权利要求4所述med-ORF10的异源表达工程菌在提高放线紫红素产量中的应用。

7.权利要求5所述med-ORF10的本源表达工程菌在提高美达霉素及卡拉芳净产量中的应用。

8.权利要求4或5所述med-ORF10表达工程菌在促进和提高放线菌合成抗生素类次级代谢产物中的应用。