[发明专利]一种快速诱导二穗短柄草组培苗不定根再生的方法

说明书

本发明公开了一种快速诱导二穗短柄草组培苗不定根再生的方法。该方法主要是选取无根的二穗短柄草组培苗，用生根粉溶液浸泡后，将组培苗种植于塑料盆中并放入人工气候室培养，两周后不定根长度可达12‑15cm；本发明的二穗短柄草快速生根方法，整合传统生根和炼苗程序，提高再生苗的存活率，缩短育苗周期，本发明可直接用于二穗短柄草再生和遗传转化体系的优化研究，也为加速植物转基因育种奠定基础。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种快速诱导二穗短柄草组培苗不定根再生的方法。

背景技术

通过植物组织培养技术研究植物基因功能的有效途径。目前该技术在植物再生工作中得到广泛的应用，但不定根的再生依然是其中重要的限速步骤，尤其是如何快速诱导不定根的形成。

二穗短柄草作为世界上分布最广泛的C3植物，因其基因组小、生长周期短、体量小、适合遗传转化等优势而被定义为新的模式植物。传统的二穗短柄草再生通过控制外界温度和光照，但是这样培养出来的二穗短柄草小苗气孔和角质层发育不完善，叶绿素水平偏低，根部与茎部连接部分的水传导能力差，容易造成植株失水死亡。因此，快速促进二穗短柄草不定根的再生，同时改善再生苗的生理状态，是解决这一难题的有效途径。

瓶外生根技术可以将生根和驯化整合起来，改善了传统生根程序的诸多弊端，提高成活率，缩短育苗周期。

发明内容

本发明的目的是提供一种快速诱导二穗短柄草组培苗不定根再生的方法，可以提高成活率，缩短育苗周期，并可用于植物再生和遗传转化研究。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种快速诱导二穗短柄草组培苗不定根再生的方法，包括如下步骤：

(1)选取无根二穗短柄草组培苗，组培苗高度2-3cm，用镊子将二穗短柄草组培苗从培养瓶中取出，清洗3-5次；

(2)清洗后的组培苗用1mg/L生根粉溶液浸泡处理3-5分钟；

(3)将浸泡过生根粉的组培苗移栽到装有混合土壤的塑料种植盆中，种植完成后，保鲜膜覆盖塑料种植盆盆口，放置人工气候室培养；

(4)每天用1mg/L生根粉溶液掀开保鲜膜喷洒2-3次，两周后测量不定根长度，为12-15cm。

步骤(1)中，所述无根二穗短柄草组培苗为二穗短柄草愈伤组织诱导出的不定芽。

步骤(2)中，所述生根粉溶液的配制方法为1mg生根粉溶解于1L蒸馏水中。

步骤(3)中，所述混合土壤为营养土、珍珠岩、蛭石以2：

1：2比例混合后，加入清水至土壤湿润。

步骤(3)中，所述人工气候室培养条件为：温度22±2℃，湿度60±10％，光照16h/黑暗8h。

本发明的优点在于：本发明利用瓶外再生的策略，改变组培苗的生长状态，并通过生根粉的协同作用，快速诱导二穗短柄草组培苗不定根的再生，提高组培苗的成活率和侧根数量，表明本发明可真实且可靠地诱导二穗短柄草组培苗不定根的形成，本发明为不定根诱导的研究积累了宝贵材料，缩短植物再生时间，有利于二穗短柄草转基因育种工作的研究。

附图说明

图1为二穗短柄草移栽于塑料种植盆的初始状态图；

图2为二穗短柄草移栽于塑料种植盆2周后的状态图。

具体实施方式

下面将结合本发明中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。

实施例1

一种快速诱导二穗短柄草组培苗不定根再生的方法，包括如下步骤：