[发明专利]甘蓝型油菜Bna.A05DAD1基因的应用及方法

说明书

本发明公开了甘蓝型油菜DAD1基因的应用及方法，利用克隆的甘蓝型油菜DAD1基因的全长编码序列，成功构建了35S启动子驱动的过表达载体。通过农杆菌侵染法分别遗传转化拟南芥与甘蓝型油菜，均获得T₃代阳性转基因植株，对转基因植株的农艺性状调查显示过表达甘蓝型油菜Bna.A05DAD1能显著增加角果长度、每角果粒数和种子千粒重，对油菜的产量增加具有重要意义。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因的应用，还涉及一种提高油菜产量的方法。

背景技术

关于我国食用植物油的记录，自宋代起开始存档，主要包括麻油、豆油、菜油与茶油。一千多年后，甘蓝型油菜(Brassica napus L.)已经在世界范围内广泛种植，与大豆、向日葵和花生并称为世界四大油料作物。除了是人类重要食用植物油来源，油菜也是重要的蛋白质饲料和工业(如生物柴油生产)原料。目前，菜籽油产量约占我国食用植物油总量的55％，但是我国作为食用油消费大国，自给率严重不足，因此油菜产量及产油量越来越受到关注。如何在提高甘蓝型油菜产量的同时，也增加油菜籽的含油量并保证其品质也是当代油菜育种的核心目标。前期通过GWAS分析鉴定出一个油菜产量性状相关候选基因DEFECTIVE IN ANTHER DEHISCENCE1(DAD1)，该基因编码叶绿体磷脂酶A1(PLA1)，参与茉莉酸(JA) 生物合成的第一步，催化磷脂转化成亚麻酸。有研究表明DAD1响应伤口诱导并参与茉莉酸合成途径，但目前多数研究主要集中于DAD1调控花药开裂的分子机制，对于DAD1参与角果发育，提高种子重量的机制尚未开展研究。因此，有必要对DAD1基因增加甘蓝型油菜角果长度与籽粒重量方面进行研究。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因的用途，在增加甘蓝型油菜角果长度、每角果粒数与千粒重中的应用；本发明还提供了一种提高油菜产量的方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因在制备增加植物单株角果长度中的应用，所述甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的，所述植物为甘蓝型油菜。

2、甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因在制备增加植物每角果粒数中的应用，所述甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3、甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因在制备增加种子的千粒重中的应用，所述甘蓝型油菜 BNA.A05DAD1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4、一种提高油菜产量的方法，其特征在于：通过在油菜中过量表达甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因，所述甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的，所述过量表达甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因的方法是克隆甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因，然后构建植物过表达载体，获得含有甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因的植物过表达载体，再将获得的植物过表达载体通过农杆菌介导转化油菜，筛选转基因植株，获得高产油菜。

优选的，所述克隆甘蓝型油菜BNA.A05DAD1基因是以SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示序列为引物，以甘蓝型油菜cDNA为模板进行PCR扩增获得。

优选的，所述植物过表达载体由SEQ ID NO.1所示序列连入pENtry-D/TOPO，然后Gateway 方法将Bna.A05DAD1 CDS序列与pEarlyGate101植物表达载体重组而得。