[发明专利]一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用

说明书

本发明公开了一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株命名为IBD17JL01，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.19291。该病毒株为本发明首次分离鉴定的一株自然适应DF1和CEF体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典毒株，该株病毒能够直接在体外传代细胞系DF1细胞、CEF细胞或DT40细胞上增殖。将该毒株灭活后制备成灭活疫苗，可使免疫雏鸡对强毒攻击产生100％的保护效果。因此，该病毒株(IBD17JL01株)可以作为天然适应体外细胞培养的疫苗候选株，用于IBDV的免疫防控。

技术领域

本发明涉及一株新型的鸡传染性法氏囊病病毒株及其应用，特别涉及一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用。本发明属于生物技术领域。

背景技术

传染性法氏囊病(infectious bursal disease，IBD)是鸡的一种重要的免疫抑制病，其病原是传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus，IBDV)。IBDV有两个血清型：血清I型和血清II型。血清I型对鸡致病，血清II型对鸡不致病。血清I型分为经典株、超强毒株和变异株，经典株和超强毒株的抗原性一致。IBDV经典株引起的传染性法氏囊病首次于1957年在美国爆发。上世纪80年代末，IBDV变异株和超强毒相继出现并迅速传遍全球。目前这三种毒株在我国均流行。

IBDV对养禽业的危害分直接危害和间接危害。直接危害：摧毁中枢免疫器官法氏囊，且能直接致死。间接危害：IBDV感染耐过的鸡免疫力低下，造成禽流感、新城疫等其它重要疫病的疫苗免疫失败，且易造成继发感染，影响鸡群生产性能，造成严重经济损失。总之，IBD严重影响养禽业的健康发展，其防控形势十分严峻。

IBDV的基因组由A、B两个节段组成。A节段全长约3200bp，编码多聚蛋白(PP，VP2-VP4-VP3)和VP5蛋白，PP进一步自剪切成熟为VP2、VP3、VP4。其中，VP2和VP3是IBDV重要的结构蛋白。VP2是组成病毒衣壳的重要成分，其位于病毒粒子的最外侧，是关键的宿主保护性抗原。B节段全长约2800bp，编码具有RNA依赖的RNA聚合酶活性的VP1蛋白，其在病毒基因的转录和翻译中发挥重要作用。

疫苗免疫是IBD防控的重要手段。是否能够获得适应体外细胞培养的疫苗株是疫苗研制和生产的关键瓶颈。然而，自然界中尚未发现能够适应鸡胚成纤维细胞(CEF细胞)及其传代细胞系DF1等体外细胞培养的IBDV野毒株，所以目前市场上的IBDV全病毒疫苗株均是来源于人工传代。传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus，IBDV)的人工传代技术存在如下缺点：①该过程费时费力，研发成本高，时效性差。②传代过程中，毒株的抗原性有可能发生变异，进而造成疫苗株与流行毒株的抗原匹配性差。③传代结果具有随机性，不一定每个传代试验都能获得理想的毒株。

本发明首次分离鉴定了一株自然适应DF1和CEF等体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典毒株(IBD17JL01株)，通过基因扩增和测序确定了病毒的全基因组，此外还检测了该病毒株的细胞嗜性，评估了其致病力，以期为鸡传染性法氏囊病疫苗的研制提供一种新的技术手段。

发明内容

本发明的目的在于提供一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其在制备鸡传染性法氏囊病灭活疫苗中的用途。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

本发明分离得到的一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株，命名为IBD17JL01，分类命名为鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal D iseaseVirus，IBDV)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.19291，保藏时间为2020年01月08日。