[发明专利]牙鲆IL-34基因的应用

说明书

本发明涉及分子生物学领域，具体的说是牙鲆IL‑34基因在抗细菌感染应用。牙鲆IL‑34基因在制备抗细菌感染的制剂中的应用。本发明的牙鲆IL‑34基因表达质粒注射牙鲆后能够显著提高牙鲆抵抗细菌感染的能力。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体的说是牙鲆IL-34基因在抗细菌感染应用。

背景技术

IL-34是一个较新发现的白细胞介素,其与colony-stimulating factor-1(CSF-1)有共同的受体，即CSF-1R,但IL-34与CSF-1没有明显的序列共同性。在哺乳动物中，IL-34与CSF-1R结合后，可激活NF-κB、PI3K/AKT、JAK/STAT、MAPK、ERK1/2、JNK等通路。IL-34在包括在吞噬细胞、上皮细胞等多种细胞中表达，并且其表达受到促炎因子、微生物病原等的调控。在功能上，IL-34调控单核吞噬细胞(单核细胞、巨噬细胞以及破骨细胞等)的分化、增值以及存活，通过NF-κB信号途径调控炎症反应以及疾病等。与哺乳动物相比，鱼类IL-34研究较少，主要聚焦于IL-34基因的转录表达，功能研究很少。牙鲆IL-34研究尚无报道。

发明内容

本发明目的在于提供牙鲆IL-34基因的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种牙鲆的IL-34基因的应用，牙鲆IL-34基因用于制备抗细菌感染的制剂中的应用。

所述表达牙鲆IL-34基因的质粒pCN3-IL-34在制备牙鲆抗细菌感染制剂中的应用。

所述牙鲆IL-34基因的表达质粒pCN3-IL-34为以牙鲆cDNA为模板，分别用引物F1/R1进行PCR扩增，扩增产物与载体pCN3连接，即获得含IL-34基因质粒pCN3-IL-34；所述F1为5’-GATATCGCCACCATGATCCAACTGTCCACCTCA-3’；R1为5’-GATATCGCCACCGCTCTCTTCTTTCTTCCTGCCT-3’。

所述细菌为迟缓爱德华氏菌。

本发明具有如下优点：

本发明的牙鲆IL-34基因表达质粒注射后能够促进炎症因子如IL-1beta,IL-6和IL-8的表达，并能显著提高牙鲆的抗细菌能力。

附图说明

图1为本发明实施例提供的牙鲆IL-34基因表达质粒抑制迟缓爱德华氏菌感染(**P0.01)。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例旨在对本发明进行举例描述，而非以任何形式对本发明进行限制。

在本发明实施例中所涉及到的常规性实验方法均采用如下方法：

1.质粒提取、DNA(PCR)产物纯化、DNA片段从凝胶中回收皆使用“天根生化科技(北京)有限公司”的相应试剂盒。

2.大肠杆菌用Hanahan方法(Sambrook and Russell:Molecular Cloning:ALaboratory Mannual.Cold Spring Harbor Laboratory Press 2001)。

3.所有限制性内切酶和连接酶皆购自于“纽英伦生物技术有限公司”，北京。

实施例1

牙鲆IL-34基因表达质粒pCN3-IL-34的构建：