[发明专利]芫花根中总黄酮及其制备和应用

说明书

本发明涉及植物医药技术领域，涉及芫花根活性总黄酮的制备和应用，尤其涉及植物芫花根中活性总黄酮的提取方法及所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明的芫花根活性总黄酮通过如下方法制备：将芫花的干燥根粉碎，用乙醇回流提取。将提取液减压浓缩，直到浓缩液无明显乙醇味。加热条件下，浓缩液加入碱液，趁热抽滤，调至酸性，静置，得到沉淀。将沉淀分散于水中，用乙酸乙酯萃取，得到萃取物。将萃取物经活性导向，通过大孔树脂、聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱制备得到芫花根活性总黄酮。经体内外药理实验证明，本发明所提供芫花根活性总黄酮具有较好的抗肿瘤，尤其是抗肝癌活性，可以用于制备抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及植物医药技术领域，涉及芫花根活性总黄酮的制备和应用，尤其 涉及植物芫花根中活性总黄酮的提取方法及所述的化合物在制备抗肿瘤药物中 的应用。

背景技术

肝癌是病死率最高的恶性肿瘤之一。肝癌具有恶性程度高、复发率高、转移 率高的特点。迄今为止，肝癌的致病原因尚待研究。目前认为肝癌的发生是由病 毒性特异因子、免疫机制、环境因素和个体遗传背景相关基因共同作用的结果。 研究报道芫花根的黄酮类成分具有一定的抗肝癌活性。所以寻找肝癌特效的治疗 药物成为亟需解决的问题。

芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)为瑞香科(Thymelaeaceae)瑞香属(Daphne)植物，又名杜芫、老鼠花，广泛分布于我国长江流域各省和黄河流域 的部分地区。芫花作为我国传统中药，内服用于治疗水肿胀满，胸腹积水，痰饮 积聚，气逆咳喘，二便不利，外用治疗疥癣秃疮和冻疮，常作为泻下药、镇咳祛 痰药、堕胎药使用。其所含化学成分多样，主要包括黄酮类、香豆素类、萜类和 木脂素类化合物，其中黄酮类化合物是芫花根中含量较高的一类活性物质，具有 抗肿瘤、抗氧化、抗病毒，免疫调节等活性，对心血管疾病也有明显的防治作用。 黄酮类化合物主要为毛瑞香素系列的双黄酮，种类多且含量高。

发明内容

本发明的主要目的在于提供上述芫花根中总黄酮作为制备抗肝癌药物的用 途。

本发明的另一目的在于提供一种制备上述芫花根中总黄酮的方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供芫花根中总黄酮的提取工艺，通过如下 方法制备：

将芫花的干燥根粉碎，用乙醇回流提取。将提取液减压浓缩，直到浓缩液无 明显乙醇味。加热条件下，浓缩液加入碱液，趁热抽滤，调至酸性，静置，得到 沉淀。将沉淀分散于水中，用乙酸乙酯萃取，得到萃取物。将萃取物经活性导向， 通过大孔树脂、聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱制备得到芫花根活性总黄酮。

进一步地，本发明通过如下方法制备：

(1)将芫花的干燥根粉碎，用乙醇回流提取；

(2)将提取液减压浓缩，直到浓缩液无明显乙醇味；

(3)浓缩液加热至50-80℃，搅拌条件下加入碱液，调节PH至8-13，保持 20-30min，趁热过滤，滤液在50-80℃，搅拌条件下用酸调节至PH至2-5，静置 冷却至室温，放置析出沉淀，抽滤，收集沉淀物；

(4)加入去离子水分散沉淀物，以乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯层颜色变浅， 收集乙酸乙酯萃取液，旋干得到萃取物；

(5)将萃取物经活性导向，通过大孔树脂分离得到Fr.1-Fr.3；

(6)将Fr.2通过聚酰胺柱色谱分离得到Fr.2-1-Fr.2-3；

(7)将Fr.2-2通过硅胶柱，用二氯甲烷:甲醇系统进行洗脱，浓缩得到芫花 根活性总黄酮。

其中，

步骤(1)中的乙醇的浓度为70-80％；乙醇体积为芫花根重量的8-10倍； 提取温度为60-70℃；提取时间为2-3h；提取次数为2-3次。