[发明专利]一种粪便保存液及其制备方法

说明书

本发明的目的在于提供一种粪便保存液，应用于粪便保存中，该粪便保存液在常温下即可长时间保存粪便样本，且能有效抑制粪便样本中DNA降解及细胞受损，维持细胞形态，抑制降解酶和微生物活性效果佳。本发明还提供上述粪便保存液的制备方法，通过上述制备方法制得的粪便保存液用于粪便保存。本发明一种粪便保存液，包括：螯合剂10‑500mmol/L、抑菌剂1‑100g/L、离子强度维持剂1‑10g/L、细胞保护剂1％‑50％(v/v)和变性剂1‑50g/L。

技术领域

本发明涉及生物制剂技术领域，涉及一种粪便保存液及其制备方法。

背景技术

近年来，人粪便当中脱落细胞的检测由于无创无痛且特异性高等特征，常用于结直肠癌等疾病的初筛普查，较之化学法或免疫法的粪便隐血试验、全直肠镜检查等方法更能达到″早发现、早诊断、早治疗″的目的，且从肿瘤的三级预防角度而言，强调I级预防和II级预防是最有效最节约成本的降低结直肠癌发病率和死亡率的方法。

但粪便成分十分复杂，含有大量的消化残余及细菌产生的各种核酸降解酶如蛋白酶、DNA酶(DNases)和RNA酶(RNases)、各种PCR抑制剂(如胆盐、胆红素、腐殖质和色素)，使得粪便样本中的细胞及核酸极易受到破坏和降解。目前常用的保存方法是通过采集粪便样本后立即冻存在-20℃或者更低的温度中，以避免脱落细胞的降解或其它生化反应。但是，粪便样本采集很多时候并不是在实验室中进行，也就是说，采集的粪便样本或多或少都需要在常温下放置一段时间才能放入冰箱中-20℃保存；这个过程容易造成原本就很少量的脱落细胞进一步损失，从而影响后续检测。

目前的粪便样本保存方法，可保存时间短，样本再度利用合格率低，保存条件苛刻，成本高。因而，目前的粪便样本液及保存方法仍有待改进。因此，所期望的是提供一种能够在常温下长时间有效保持粪便样本的粪便保存液，该粪便保存液能有效抑制粪便样本中DNA降解及细胞受损，抑制降解酶和微生物活性，且不影响粪便检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种粪便保存液，应用于粪便保存中，该粪便保存液在常温下即可长时间保存粪便样本，且能有效抑制粪便样本中DNA降解及细胞受损，维持细胞形态，抑制降解酶和微生物活性效果佳。

本发明还提供上述粪便保存液的制备方法，通过上述制备方法制得的粪便保存液用于粪便保存。

本发明一种粪便保存液，包括：螯合剂10-500mmol/L、抑菌剂1-100g/L、离子强度维持剂1-10g/L、细胞保护剂1％-50％(v/v)和变性剂1-50g/L。

作为进一步优选的技术方案，所述粪便保存液包括如下成分：

螯合剂20-500mmol/L、抑菌剂1-50g/L、离子强度维持剂5-10g/L、细胞保护剂1-40％(v/v)和变性剂5-30g/L。

作为进一步优选的技术方案，所述粪便保存液包括如下成分：

螯合剂50-350mmol/L、抑菌剂1-20g/L、离子强度维持剂8-10g/L、细胞保护剂1％-30％(v/v)和变性剂5-20g/L。

作为进一步优选的技术方案，所述粪便保存液的pH值为6.0-11.0，优选为7.0-11.0，进一步优选为7.0-9.0。

优选地，所述粪便保存液的pH通过加入缓冲液进行调解；

优选地，所述缓冲液包括Tris-HCl、磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液或Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液。

作为进一步优选的技术方案，所述螯合剂包括有机螯合剂；

优选地，所述螯合剂包括乙二胺四乙酸盐、1，2-环己二胺四乙酸盐、二乙基三胺五乙酸盐、三乙基四胺盐、乙二醇双氨乙基醚四乙酸、二乙基二硫代氨基甲酸、次氮基三乙酸和乙二胺二琥珀酸三钠中的至少一种；