[发明专利]马流产沙门氏菌马源株及其在制备马流产沙门氏菌灭活疫苗中的应用

说明书

本发明公开了马流产沙门氏菌马源株及其在制备马流产沙门氏菌灭活疫苗中的应用，属于生物疫苗技术领域。本发明所述的马流产沙门氏菌马源株，命名为20180316.H.AES.G，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.18341。本发明的马流产沙门氏菌马源株20180316.H.AES.G具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的马流产沙门氏菌马源株接种于沙门氏菌增菌液，培养后，用0.2％v/v甲醛灭活，制成灭活疫苗。实验证明，使用本发明制备得到的马流产沙门氏菌灭活疫苗免疫小鼠，攻毒后，能使小鼠免于死亡，免疫马体后，安全性良好。因此该疫苗具有安全、低剂量免疫等优点。本发明首次提出了一种马流产沙门氏菌灭活疫苗，可以用于预防由马流产沙门氏菌引起的流产。

技术领域

本发明涉及一种马流产沙门氏菌其在制备马流产沙门氏菌灭活疫苗中的应用，特别涉及一株自行分离得到的马流产沙门氏菌马源株以及由该细菌株制备得到的 灭活疫苗。本发明属于生物疫苗领域。

背景技术

马流产沙门氏菌病(Equine abortus salmonellosis)，又称为马副伤寒性流产(Equi parathphoid)，是由马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi)引起的以马 属动物流产为特征的传染病，只对马属动物具有致病性，具有菌体抗原4、12，鞭 毛第二相抗原H-enx。早在18世纪末19世纪初，欧美地区发生过大批马流产的现象， 20世纪70年代末，我国华北、西北、东北等养马地区也陆续爆发马流产沙门氏菌病， 并造成了比较严重的经济损失，该病全年都可发生，但主要发生于春秋两季，大多 数表现为散发，有时呈地方流行性。马流产沙门氏菌易感染初孕马，主要在妊娠后 期流产，多数马在发生流产前，一般无明显临床症状，突发流产，绝大多数为死胎， 有少数存活的胎儿，在出生几天后，也会发生死亡。妊娠母马流产时，病原菌随流 产胎儿、胎衣、羊水及阴道分泌物排出体外，患病公马可随精液排菌。感染马流产 沙门氏菌的马常常成为该菌的病原携带者，也通常被认为是非疫区最初的传染源。 在国际上，该病在欧美等国得到了很好的控制，一些国家偶有零散报道，比如克罗 地亚(欧洲)报道发生了2起马流产疫情，流产率分别为11％和44％；非洲及亚洲国 家是马流产主要的流行地区，但是并没有采取太好的防控措施，疫病控制的效果也 不明显；我国上一次暴发马流产疫情是在20世纪80年代，之后的30年间鲜有相关的 报告。所以，马流产沙门氏菌引起的马流产越来越不受到关注，国内外的相关研究 也不多见，更不深入，是一种被忽视的传染病。然而，近年来该病有卷土重来的态 势，上个世纪爆发过马流产疫情的阿根廷、意大利、日本等国近几年再次出现相关 报道；我国自2014年起，各地陆续发生马流产疫情，内蒙古呼伦贝尔市仅一年发生 的马流产的流产率高达66.7％，之后5年陆续在呼伦贝尔市点状暴发，流产率为30～100％，其中大部分为草原上开放式散养马群，从疫病传播速度快、波及范围广 的特点来看，疑似马流产沙门氏菌病暴发。马流产沙门氏菌主要通过污染的水和食 物以及交配进行传播，母马流产时造成环境污染，难以根除，会持续在马群中传播。 该病的发生直接影响了我国马匹的存栏量、造成严重的间接经济损失，而且该病还 有蔓延的趋势，对我国马业持续发展产生了潜在的威胁和巨大的影响，严重阻碍了 我国马业的发展。

本发明的发明人于2018年从内蒙呼伦贝尔市某马场流产马驹组织分离到一株 马流产沙门氏菌，经实验室鉴定为强毒株，命名为20180316.H.AES.G。利用20180316.H.AES.G株，开展了马流产沙门氏菌灭活疫苗的研制开发工作，筛选培 育出免疫原性良好的马流产沙门氏菌强毒20180316.H.AES.G株，选择了符合制 造疫苗的灭活剂、佐剂及其他条件。对制品的生产工艺、安全性、保护率、免疫 程序、最小剂量、抗体持续期和保存期等都进行了试验测定，并获得了大量的试验 数据，实验证明，使用本发明制备得到的马流产沙门氏菌灭活疫苗免疫小鼠，攻毒 后，能使小鼠免于死亡，免疫马体后，安全性良好。因此该疫苗具有安全、低剂量 免疫等优点。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种免疫原性良好、效价稳定的马流产沙门氏菌菌 株；