[发明专利]一种用于真菌毒素检测的通用型免疫亲和柱

说明书

本发明提供了一种用于真菌毒素检测的通用型免疫亲和柱，包括柱管、筛板、填料和真菌毒素抗体，所述柱管的底部设有出液口，所述的真菌毒素抗体独立分装于储存管中，所述的真菌毒素抗体偶联有生物素，所述的填料偶联有链霉亲和素。该免疫亲和柱使用的填料偶联有链霉亲和素，该填料只需要与修饰有生物素的抗体亲和结合即可将抗体修饰到填料的表面，将填料填充到柱管中即可对样本进行前处理。本发明所制得的免疫亲和柱的柱容量为可以达到5000ng，同时对实际样本检测的回收率高，变异系数小，因此该免疫亲和柱对样本具有良好的前处理效果和较高的稳定性，并且可以同时进行多种目标物的高通量吸附，在食品安全检测领域具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于食品安全检测领域，具体涉及一种用于真菌毒素检测的通用型免疫亲和柱。

背景技术

真菌毒素（Mycotoxins）是产毒真菌在一定环境条件下产生的次级代谢产物，广泛污染农作物、食品及饲料等植物源性产品。在粮食、食品和饲料中比较常见的真菌毒素有：黄曲霉毒素（aflatoxin，AF）、赭曲霉毒素（ochratoxin，OT）、伏马菌素（fumonisin，FB）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇 （deoxynivalenol，又称呕吐毒素，DON）、T-2 毒素、HT-2 毒素、展青霉素（patulin）等。真菌毒素可以引起人类和动物的急性或慢性中毒，可损害机体的肝脏、肾脏、神经组织、造血组织及皮肤组织等， 事实上，许多真菌毒素的毒性作用是多器官性的，即可同时损害两个以上的器官和组织。据联合国粮农组织估计，全球每年约有25%的农作物遭受真菌及其毒素污染，约有2%的农作物因污染严重而失去营养和经济价值。据估算，全球每年因真菌毒素污染而造成的直接及间接损失将达到数百亿美元。目前真菌毒素已经构成重要的食品安全问题，市场上销售的粮食（玉米、小麦）类、花生及其制品类以及一些调味品等受真菌毒素污染的情况已经不容忽视。

现有的检测方法分为快速筛选法和确证法两大类。快速筛选法主要是酶联免疫法，此方法具有特异性强、灵敏度高、前处理简单、无需昂贵仪器、易于推广等优点，但此法存在一定的假阳性，不能作为最终的确证方法。真菌毒素检测的确证方法有薄层层析色谱法（TIC）、液相色谱法（HPLC）、以及液质联用（LC--MS）检测法等。

然而，现有的成品免疫亲和柱装填的填料上一般偶联某一特定目标物吸附的抗体，或者几种偶联填料的混合，需要在生产环节填装好，并确定适用检测的目标物质。因此，柱管在使用的过程中不具有通用性，免疫亲和柱的利用率低、使用范围小。因此，有必要对现有的免疫亲和柱进行进一步的改进。

发明内容

为了解决以上现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种用于真菌毒素检测的通用型免疫亲和柱。

为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

一种用于真菌毒素检测的通用型免疫亲和柱，包括柱管、筛板、填料和抗体，所述柱管的底部设有出液口，每种抗体独立分装于储存管中，所述的抗体偶联有生物素，所述的填料偶联有链霉亲和素。

进一步的，所述的抗体为真菌毒素抗体，所述的真菌毒素抗体包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2 毒素、HT-2 毒素或展青霉素。

进一步的，所述的偶联有生物素的真菌毒素抗体为液体状态或冻干粉剂。

进一步的，所述的填料为凝胶填料或纳米颗粒填料。

优选的，所述的凝胶填料为琼脂糖凝胶填料或壳聚糖凝胶填料。

优选的，所述的纳米颗粒填料为磁纳米粒子或聚苯乙烯微球。

进一步的，一种或多种真菌毒素抗体通过生物素链霉亲和素亲和结合在柱管内的填料上。