[发明专利]一种检测脂滴的有机硅荧光探针

说明书

本发明提供了一种检测脂滴的有机硅荧光探针：。本发明的探针具有AIE效应，通过判断荧光的强弱可以区分不同的细胞。利用本发明的探针通过荧光成像技术可于评价和研究癌细胞的生理功能，对研究获得癌细胞的生理功能有潜在的应用价值。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种检测脂滴的荧光探针及其应用。

背景技术

脂滴由于其特殊的结构和生理功能，最近得到广大研究者的关注。脂滴作为富含脂质的亚细胞器，在真核细胞中广泛存在，由中性脂质的核心组成，所述中性脂质由安装相关蛋白质的单层磷脂包围。除了作为能量储存器外，脂滴还参与各种生理过程，包括细胞活化，迁移，增殖，凋亡等。越来越多的证据表明脂滴的异常与癌症发展有关。据报道，癌细胞中脂滴的数量高于正常细胞，因为脂滴提供的大量能量是癌细胞更快的增殖所必需的。此外，由于癌细胞中脂质代谢的特定改变，癌细胞中脂滴的极性低于正常细胞。因此，结合两个指标（脂滴的数量和极性）能够定位癌变细胞。然而，目前通过监测脂滴的数量和极性变化来定位癌变细胞的研究尚未实现。

传统检测癌细胞的方法有许多的不方便与限制性，荧光探针因其快速方便、灵敏度高、即时检测和响应迅速等众多优势，近年来再快速发展。这些优点使得其在化学、生物医学等学科领域都有着较为广泛的应用，尤其是在生物医学领域，荧光探针不仅可以用于体外分析还可以用于活体的影像学研究。近年来，检测癌细胞的小分子荧光探针被大量报道。然而，其中许多探针水溶性差、灵敏度低、pH的变化对检测的效果影响较大，另有一些探针生物毒性大、细胞膜渗透能力差，这些缺陷很大程度上影响了小分子探针的应用。因此发展稳定灵敏的检测癌细胞的探针具有十分重要的意义。

发明内容

针对目前探针水溶性差、灵敏度低、pH的变化对检测的效果影响较大，探针生物毒性大、细胞膜渗透能力差的问题，本发明提供一种检测脂滴的有机硅荧光探针，响应速度快、抗干扰能力强。

本发明的另一目的是提供一种上述荧光探针在检测细胞内脂滴的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种检测脂滴的有机硅荧光探针，简称TR，其化学结构式如式（I）所示：

式（I）。

上述有机硅荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

（1）氨丙基硅油和4-溴-1,8-萘酐在乙醇中加热回流反应，反应结束后过滤，滤渣以体积比为1:20的甲醇：二氯甲烷为淋洗液过硅胶柱，然后干燥得化合物1：

；

（2）保护气氛下，化合物1和4-硼酸三苯胺在甲苯中在K₂CO₃存在下以四（三苯基磷）钯催化加热回流反应，反应结束后以体积比为1:10的甲醇：二氯甲烷为淋洗液过硅胶柱，然后干燥得有机硅荧光探针：

。

所述氨丙基硅油和4-溴-1,8-萘酐的质量比为5:1。

所述化合物1和4-硼酸三苯胺的质量比为1:0.8-1。

步骤（1）和步骤（2）中，反应温度为80℃。

一种上述有机硅荧光探针在制备检测细胞脂滴数量和极性试剂中的应用。

本发明的机理如下：

本发明的探针TR具有AIE效应，且在脂滴中溶解度差。当细胞中脂滴含量增加时会使细胞极性降低，从而使细胞质中的探针TR含量相对提高，引起荧光强度增大，且发射波长发生蓝移。通过判断荧光的强弱可以区分不同的细胞。

本发明具有以下优点：