[发明专利]用于治疗和控制植物病害的方法和组合物

说明书

本发明提供开发用于控制由苛养木杆菌(Xylella fastidiosa)引起的植物病害的基于有毒噬菌体的治疗的方法。本发明还提供分离和繁殖在黄单胞菌属(Xanthomonas)细菌宿主中对苛养木杆菌(X.fastidiosain)有毒的噬菌体和用于治疗或减少植物中苛养木杆菌感染症状的方法。本发明还提供分离和繁殖对地毯草黄单胞菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.citri)有毒的噬菌体和用于治疗或减少植物中地毯草黄单胞菌柑橘致病变种感染症状的方法。

本申请是2013年10月18日提交的发明专利申请201380054534.6的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2012年10月19日提交的美国临时申请号61/716,245和于2013年3月14日提交的美国临时申请号61/785,535的权益，二者通过引用完全结合于此。

关于联邦政府资助的研究的声明

依照下述，美国政府享有本发明的某些权利：动植物卫生检验局(APHIS)关于德克萨斯皮尔斯疾病研究与教育项目(Texas Pierce’s Disease Research&EducationProgram)的合作协议奖，协议号为11-8500-0955-CA，授予AgriLife研究；和Otsuka制药有限公司(Otsuka Pharmaceutical Co.，LTD)，协议号为406039，授予AgriLife研究。

序列表的并入

命名为“TAMC019WO_ST25.txt”的文件中所包含的序列表以电子形式提交并且通过引用结合在本文中，该文件在Microsoft Windows操作系统中测量为907kb，并且是在2013年10月17日生成的。

发明领域

本发明涉及植物病理学领域。更具体地，本发明涉及用于分离噬菌体和用于治疗由苛养木杆菌(Xylella fastidiosa)和地毯草黄单胞菌(Xanthomonas axonopodis)引起的植物病害的方法和组合物，包括作为细菌病毒的噬菌体的应用。

发明背景

在植物中，细菌可能引起多种病害，包括葡萄藤的皮尔斯病(Pierce’s Disease)和柑橘属植物的柑橘溃疡(Citrus Canker)。细菌感染植物组织，并且可能引起萎蔫、生长差、损害果实，甚至是植物死亡。感染可能通过风、雨、被污染的设备或媒介昆虫传播而发生，其迅速地传播到其他植物上，并且导致对所述植物的有害的作用和大量的农作物损失。这些病害的有效治疗需要一种治疗植物消除细菌的方法。

发明概述

在一方面，本发明提供繁殖其宿主范围包括苛养木杆菌(X.fastidiosain)的有毒噬菌体(bacteriophage或phage)的方法，所述方法包括用所述噬菌体感染黄单胞菌属(Xanthomonas)细菌的培养物，允许所述噬菌体繁殖，并且从所述培养物中分离噬菌体颗粒。在另一个实施方案中，所述黄单胞菌属细菌包括物种菌株EC-12。在另一个实施方案中，所述噬菌体通过结合细胞表面特征而感染细胞。在另一个实施方案中，所述细胞表面特征是IV型菌毛。在另一个实施方案中，所述噬菌体包括来自由podophage、siphophage和myophage组成的组的有尾噬菌体。在其他实施方案中，所述噬菌体是从环境、污水处理厂或流出物、植物或其表面或从环境土壤中分离的。在本发明的其他实施方案中，利用替代宿主(surrogate host)来富集有毒噬菌体。在另一个实施方案中，所述噬菌体对苛养木杆菌有毒。在其他实施方案中，利用琼脂覆盖(agar overlaying)来生长所述噬菌体。