[发明专利]饲用乳酸菌的培养方法

说明书

本发明提供饲用乳酸菌的培养方法，属于微生物技术领域，将活化后的饲用乳杆菌种子液接种到pH为6.3‑6.7、含有乳清蛋白水解物的发酵培养基中进行震荡培养，获得饲用乳杆菌发酵液；其中乳清蛋白水解物为：将乳清蛋白用含有D构型酸的盐酸溶液酸水解。本发明培养方法能实现高密度培养，所用发酵培养基能够阻止氧对饲养乳酸菌的伤害，为饲用乳酸菌提供更多的ATP，延长发酵培养基对饲用乳酸菌的生长需要，提高饲用乳酸菌的酸胁迫抗性和繁殖数量，实现高密度培养。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及饲用乳酸菌的培养方法。

背景技术

进入新世纪，我国的畜禽养殖业有了飞速的发展。规模化养殖进程越来越快，科技养殖也有了广泛的应用。但是养殖业一直以来存在的弊端却没有得到很好的解决。如抗生素长期滥用导致的药物残留和细菌耐药性，对人类的健康潜在着很大的危害。再者在畜禽养殖中产生的粪便和污水，如果没有妥善的处理或利用，则会严重的污染环境，影响人类的生存。微生态学理论的提出和深入研究，是解决养殖业存在问题的主要手段，逐渐受到人们的重视。微生态制剂以其无残留、无毒副作用、无耐药性、成本低、效果显著、对环境无污染等特点，逐渐得到养殖界的认同。

乳酸菌具有改善肠道微生态环境、增加营养物质利用率、提高动物机体免疫力等多种生物学功能，已被广泛的应用于发酵食品、动物饲料和保健食品中。乳酸菌是生产微生物发酵饲料过程中使用最广泛也是最常用的一类菌。我国农业部允许用作饲料添加剂的乳酸菌有：干酪乳杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、屎链球菌、乳酸片球菌、嗜酸乳杆菌、乳链球菌、唾液乳杆菌等。乳酸菌是肠道内的正常菌群，它们通过降解碳水化合物生成乳酸和其他有机酸使肠道环境的pH下降从而抑制其他微生物杂菌的生长繁殖，抵抗革兰氏阴性致病菌，维持肠道中正常的生态平衡；增强体液免疫和细胞免疫，增强抗感染能力，增加机体肠黏膜的免疫调节活性，降解氨、吲哚、粪臭素等有害物质，并可产生一种特殊的抗菌活性蛋白-乳酸菌素，能有效抑制大肠杆菌和沙门氏菌的生长。乳酸菌的生产主要通过液体培养，但由于乳酸菌对营养和培养条件要求比较苛刻，并且在生长过程中不断消耗营养底物和产生有机酸等代谢产物，抑制了菌体自身的生民繁殖，采用常规方法培养时培养液中的活菌数一般只能达到10⁷～10⁹cfu/mL，较低的生物量制约了乳酸菌的工业化生产及应用。高密度培养(HDC)是提高微生物产量的有效途径和手段，由于不同菌种(或菌株)所能达到的最高菌体浓度相差较大目前对高密度培养没有确切定义，一般是指在液体发酵培养中，采用一定的技术手段和设备将菌体密度提高到常规培养数倍以上的培养技术。相对于普通陪养，高密度培养的优势在于可减少培养体积、缩短生产周期，获得较高的目标菌体密度，减少动力消耗从而降低生产成本。乳酸菌的高密度培养已广泛应用于乳制品行业而在词料行业中的研究和应用才刚刚起步，仍有诸多技术难题尚待解决。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能实现高密度培养的饲用乳酸菌发酵培养基，其所用培养基能够阻止氧对饲养乳酸菌的伤害，为饲用乳酸菌提供更多的ATP，延长发酵培养基对饲用乳酸菌的生长需要，提高饲用乳酸菌的酸胁迫抗性和繁殖数量。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

饲用乳酸菌的培养方法，将活化后的饲用乳杆菌种子液接种到pH为6.3-6.7、含有乳清蛋白水解物的发酵培养基中进行震荡培养，获得饲用乳杆菌发酵液；其中乳清蛋白水解物为：将乳清蛋白用含有D构型酸的盐酸溶液酸水解。本发明培养方法能实现高密度培养，所用培养基用乳清蛋白水解过程中D构型酸的存在能够增加酸水解过程中D-型氨基酸的生成，而D-型氨基酸和一定聚合度的菊粉的存在使得到的乳清蛋白酸水解物能被饲用乳酸菌中存在的异型乳酸菌利用，而产生中间产物乙酰磷酸被转化成乙酸，即一分子葡萄糖产生两分子的三磷酸腺苷，这使得在发酵培养基内营养物质不变的情况下为饲用乳酸菌提供更多的ATP，延长发酵培养基对饲用乳酸菌的生长需要，提高饲用乳酸菌的酸胁迫抗性和繁殖数量，实现高密度培养。