[发明专利]一种从酪蛋白中提取降血压活性肽的方法

说明书

本发明公开了一种从酪蛋白中提取降血压活性肽的方法，涉及食源性活性肽开发相关技术领域，包括十个步骤，用两步酶解法，能够简便、快速的获得较高活性的降血压肽。乳酪蛋白降血压肽，与合成降血压产品相比，食用安全性高、无副作用，特别是其对高血压患者具有降压作用，但对血压正常人无降压作用。可广泛应用于治疗心血管疾病方面的药品、保健食品和食品添加剂中。本发明在采用牛乳或者酪蛋白为原料开发生物活性肽，原料非常丰富，价格低廉，可满足大规模工业化生产，对于牛乳产品多样化，酪蛋白生物活性肽在功能性食品、保健食品或者药品中的开发利用具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及食源性活性肽开发相关技术领域，特别涉及一种从酪蛋白中提取降血压活性肽的方法。

背景技术

大量的研究发现，蛋白质在人体内并不完全是以氨基酸的形式被人体所吸收，而更多的是以小分子肽的形式被人体吸收利用。这些由数个氨基酸组成小分子肽不仅具有营养功能和生理活性，还具有一定的功能特性，如抗氧化性、抗菌性、提高免疫性等诸多新功能。

降血压肽就是这样一种具有降低血压功能的小分子肽，分子量主要集中在1500u左右，它是血管紧张素转换酶(Angiotension-converting Enzyme，ACE)的抑制剂，因而也称为ACE抑制肽(Angiotension-converting Enzyme Inhibitory peptides，ACEIP)。人体中存在肾素—血管紧张素系统(Renin-Angiotensin System，RAS)和激肽释放酶—激肽系统(Kallikrein-Kinin System，KKS)对血压的调节起着重要作用。ACE催化RAS系统中的血管素Ⅰ转化成具有强烈血管收缩作用的血管紧张素Ⅱ，将KKS系统中具有血管扩张作用的缓激肽降解成无活性的缓释肽，通过这两种方式引起血压上升。ACE抑制肽与ACE结合后阻止了其对血管紧张素Ⅰ及缓激肽的催化分解，从而起到了降低血压的作用。

鉴于高血压的普遍性及安全降压的重要性，乳酪蛋白肽作为天然食品来源的降血压药物成，分更容易被高血压人群接受，但是已有的降血压活性肽的分离方法较为繁琐、耗时。因此，发明一种从酪蛋白中提取降血压活性肽的方法来解决上述问题很有必要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从酪蛋白中提取降血压活性肽的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种从酪蛋白中提取降血压活性肽的方法，包括以下步骤：

步骤一：首先取一定量的牛乳或酪蛋白加水溶解，然后调整浓度为7～10％，完后搅拌5～8min，直至牛乳或酪蛋白完全变性溶解，得到酪蛋白溶液；

步骤二：将酪蛋白溶液冷却至室温，首先将酪蛋白溶液的PH调节至5.5～8.5，然后向酪蛋白溶液中加入胃蛋白酶，进行水解反应，维持反应温度20～50℃，水解1～4h，灭酶后得到酶解溶液；

步骤三：然后向酶解溶液中加胰蛋白酶，维持反应温度30～60℃，水解3～4.5h；

步骤四：然后升温至95～110℃，维持10～25min，灭活胰蛋白酶，得到二次酶解溶液；

步骤五：将二次酶解溶液离心10～15min，静置后提取上清液，然后采用截留分子量6～10KDa的膜进行过滤，得到过滤后的酶解溶液；

步骤六：将过滤后的酶解溶液在60～75℃，25～40MPa的条件下进行均质处理，得到均质后的酶解溶液；

步骤七：将均质后的酶解溶液真空浓缩后冷冻干燥，得到白色或淡黄色的酪蛋白降血压肽粗品；

步骤八：将酪蛋白降血压肽粗品用DA201-C大孔吸附树脂吸附，大孔吸附树脂用量为20～35g/ml，吸附时间为2～5h，然后进行乙醇梯度洗脱，乙醇的体积分数为25～100％，