[发明专利]一种具有Keap1-Nrf2通路抑制活性的海洋真菌

说明书

一种具有Keap1‑Nrf2通路抑制活性的海洋真菌，所述海洋真菌的种子液接种到发酵培养基中液体培养，每升培养基接种干重0.22±0.05g的海洋真菌菌体；调节发酵培养基的pH值：发酵初始时调节培养基的pH5.8—6.4，得到海洋真菌的发酵液；将发酵液中的海洋真菌细胞进行修饰Keap1的半胱氨酸残基，使Nrf2在细胞核内积聚，并且表达Nrf2的靶基因，筛选后得到具有Keap1‑Nrf2通路抑制活性的海洋真菌；在正常条件下，Nrf2与Keap1结合，存在于细胞之中，发生氧化应激时，Keap1的半胱氨酸残基被修饰，改变构象导致Nrf2释放出来，进入细胞核中，与ARE结合后，促进靶基因的表达；它具有可为后续抗肿瘤药物的研究提供微生物资源等特点。

技术领域

本发明涉及的是一种具有Keap1-Nrf2通路抑制活性的海洋真菌。

背景技术

癌症发生以后Keap1-Nrf2通路的高表达或过度积累会降低化疗或放疗引起的过度氧化应激对肿瘤细胞的伤害，帮助其抵抗化学药物或放射治疗，有利于肿瘤细胞的存活并促进其生长。此外，在肿瘤发生之后或在恶性肿瘤中Nrf2的过度激活会引起肿瘤细胞对化疗或放射疗法的抵抗和耐受性、导致患者预后不良。由此看来，肿瘤一旦发生，Nrf2因子在细胞内积累，不但不利于肿瘤的预防，反而会增强肿瘤细胞的耐药性并促进其生长，不利于肿瘤的治疗和患者的康复。因此，发现具有Keap1-Nrf2-ARE通路抑制作用的微生物，可为后续抗肿瘤药物的研究提供资源。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，而提供一种可为后续抗肿瘤药物的研究提供微生物资源的具有Keap1-Nrf2通路抑制活性的海洋真菌。

本发明的目的是通过如下技术方案来完成的，一种具有Keap1-Nrf2通路抑制活性的海洋真菌，所述海洋真菌的种子液接种到发酵培养基中液体培养，每升培养基接种干重0.22±0.05g 的海洋真菌菌体；调节发酵培养基的pH值：发酵初始时调节培养基的pH5.8—6.4，得到海洋真菌的发酵液；

将发酵液中的海洋真菌细胞进行修饰Keap1的半胱氨酸残基，使Nrf2在细胞核内积聚，并且表达Nrf2的靶基因，筛选后得到具有Keap1-Nrf2通路抑制活性的海洋真菌。

作为优选：在正常条件下，Nrf2与Keap1结合，存在于细胞之中，发生氧化应激时，Keap1的半胱氨酸残基被修饰，改变构象导致Nrf2释放出来，进入细胞核中，与ARE结合后，促进靶基因的表达；

所述的海洋真菌选择一株——链格孢属（Alternaria sp.）MNP801，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编 430072，保藏编号 ：CCTCC No:M2012288，保藏日期2012年7月18日。

所述的发酵培养基组成为 ：麦芽浸粉3.0—7.0g/L，麦芽糖 1.5—2.0g/L，葡萄糖3.0—7.0g/L，酵母浸粉 0.8—1.5g/L，溶剂为水。

作为优选：所述发酵培养基的发酵培养中，培养温度26—30℃，发酵罐装液量是罐体容量的60-80%；和/或发酵过程中维持发酵罐的罐内压力为0.01～0.04Mpa；发酵罐中装备1-3层搅拌桨，搅拌转速80～500r/min；发酵罐中初始通气量为0.3-0.6vvm，发酵过程的最低溶氧不低于30%。

本发明具有可为后续抗肿瘤药物的研究提供微生物资源等特点。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明作详细的介绍：本发明所述的一种具有Keap1-Nrf2通路抑制活性的海洋真菌，其特征在于所述海洋真菌的种子液接种到发酵培养基中液体培养，每升培养基接种干重0.22±0.05g 的海洋真菌菌体；调节发酵培养基的pH值：发酵初始时调节培养基的pH5.8—6.4，得到海洋真菌的发酵液；