[发明专利]一株侧耳木霉及其在防治冬枣炭疽病中的应用

说明书

本发明公开了一株侧耳木霉及其在防治冬枣炭疽病中的应用。本发明的菌株为侧耳木霉(Trichoderma pleuroticola)菌株SDLTr16，是从东营市小清河河泥中分离获得的，已于2012年10月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.6694。试验表明：本发明的侧耳木霉菌生物防治制剂对冬枣炭疽病均有较好的效果，防治效果76.83‑92.40％。

技术领域

本发明属于生物防治植物病害领域。具体而言，本发明涉及一株侧耳木霉及其防治冬枣炭疽病中的应用，以及采用该侧耳木霉菌制备的生物防治制剂。

背景技术

冬枣为中国特有的晚熟枣品种，营养丰富，含有Vc、环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷等，对人类多种疾病具有良好的医疗保健作用。冬枣是黄三角流域主要经济果木，也是当地的主导产业之一，发展势头迅猛，仅沾化县种植面积就达50万亩，产量3亿kg。近几年来冬枣病害发生日趋严重。冬枣炭疽病(winter jujube anthracnose)是由炭疽菌属真菌引起的一类重要病害，各冬枣产区均有发生，已成为制约冬枣产业快速健康发展的主要障碍之一。冬枣炭疽病主要危害冬枣果实，可导致果实腐烂和提早落果，使品质下降，产量降低。冬枣炭疽病的防治，目前的防治方法就是盲目使用化学杀菌剂。长期使用化学杀菌剂，带来的一系列严重问题：农药残留、环境污染、抗药性产生、伤及非靶标生物以至于破坏生态平衡等。同时在植物病害的控制中，随着病菌抗药性的不断形成与提高，以及人们越来越担心食物链中化学残留物对健康的影响，要求降低果蔬产品用药量的呼声越来越高，越来越多的化学杀菌剂使用受到了限制，有些已被明令禁止使用。

木霉(Trichoderma spp.)，属于半知菌类的丝孢纲、丛梗孢目、丛梗孢科，是一类广泛分布于土壤、空气、枯枝落叶及各种发酵物上的真菌，从植物根圈、叶片及种子、球茎表面均可以分离到。木霉是自然界普遍存在并有丰富资源的拮抗微生物。木霉菌生长繁殖速度快，能够迅速占领营养空间，可分泌产生抗生素抑制其他病原菌生长，还可以通过营养竞争、重寄生、细胞壁降解酶以及诱导植物产生抗性等作用机制，达到抑制病害的目的，是生防菌株中研究最为广泛的菌株之一。目前已经发现的木霉菌30多个种中的许多具有生防潜力，如绿色木霉、哈茨木霉、康宁木霉、刺孢木霉和侧耳木霉等，对18个属29种植物病原菌表现出拮抗活性。木霉对植物病原菌的生物防治机制是多样而复杂的，常常是多种机制共同作用的结果，不同的菌株生防机制的侧重点不同，其生防作用效果与菌株类型、病原真菌的类型、作物类型和环境条件密切相关。

本发明发明人曾分离到一种高效解磷的耐盐侧耳木霉菌。但是，侧耳木霉用于防治冬枣炭疽病还未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于防治冬枣炭疽病的新木霉菌株——侧耳木霉菌株菌株SDLTr16。本发明的侧耳木霉菌株具有生长速度快、产孢量大、作用谱广、抗逆性强，在植物(尤其是冬枣)根际能够快速大量定殖等特点，因此具有良好的应用前景。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：本发明所提供的侧耳木霉(Trichoderma pleuroticola)菌株SDLTr16，是从东营市小清河河泥中分离获得的，已于2012年10月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCC No.6694。其具有以下生物学特性：在PDA培养基上，28℃黑暗条件下培养5天，菌落直径扩展75mm，初期白色稀疏，后变为灰绿色，絮状。反面无色。菌丝具隔，分枝。分生孢子梗便形成松柏式的分枝轮廓，分枝末端的小梗束生、对生、互生或单生，瓶形，6-9×3-5μm。分生孢子椭球形、单个、近无色，聚集时呈淡黄绿色，壁光滑或稍粗糙，4～5×3～4μm。

本发明侧耳木霉菌株SDLTr16的培养方法或繁殖方法包括：

(1)普通培养保存采用PDA培养基，配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂12g，蒸馏水1000mL；