[发明专利]CA培养基在用于培养草莓褐色叶斑病菌产孢中的应用

说明书

本申请涉及CA培养基在用于培养草莓褐色叶斑病菌产孢中的应用，其中所述CA培养基的配方如下：以总体积1000ml计，100克至400克胡萝卜的榨汁液，以及13克至25克的琼脂。

技术领域

本申请涉及CA培养基在用于培养草莓褐色叶斑病菌产孢中的应用。

背景技术

草莓褐色叶斑病菌是引起草莓、牡丹、芍药等的一种重要病原菌，现有研究主要采用PDA培养基对其进行培养，但其一般产孢量非常低，存在草莓褐色叶斑病菌产孢速度慢不够开展相关研究所用的问题。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本申请之一提供了CA培养基在用于培养草莓褐色叶斑病菌(Pilidium concavum)产孢中的应用，其中所述CA培养基的配方如下：以总体积1000ml计，100克至400克胡萝卜的榨汁液，以及13克至22克的琼脂。

在一个具体实施方式中，所述CA培养基的配方如下：以总体积1000ml计，200克至400克胡萝卜的榨汁液，以及19克至20克的琼脂。

本申请之二提供了一种培养草莓褐色叶斑病菌(Pilidium concavum)产孢的方法，其包括如下步骤：将草莓褐色叶斑病菌在PDA培养基中活化后，接种至PDA培养基上培养5d至7d，于菌落边缘同一圆周上打取直径5±3mm的菌饼，然后接种于本申请之一任意一项所述的应用中的所述CA培养基的平板上，25±2℃黑暗培养7d至9d。

在一个具体实施方式中，将草莓褐色叶斑病菌在PDA培养基中活化后，接种至PDA培养基上培养6d，于菌落边缘同一圆周上打取直径5mm的菌饼，然后接种于本申请之一任意一项所述的应用中的所述CA培养基的平板上，25℃黑暗培养8d。

本申请的有益效果：

经过大量培养基配方的筛选，本申请意外地发现CA培养基的配方特别适于草莓褐色叶斑病菌(Pilidium concavum)产孢。从而克服了现有技术中一直以来的由于草莓褐色叶斑病菌产孢速度慢且产孢量低而不够开展相关研究所用的问题。

具体实施方式

为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。

实验菌株为前期实验研究中从北京草莓上经常规组织分离、单孢挑取、PDA斜面保存的菌株，标记为BJ-4、BJ-10、BJ-12、BJ-15、BJ-17、BJ-18、BJ-20、BJ-21、BJ-25、BJ-26，经华大基因测序、rDNA ITS序列运用GenBank中Blast比对后确定为草莓褐色叶斑病菌(Pilidium concavum)，可从北京农学院获得。其分离方法按照文献kaivan KARIMI,MAHDIARZANLOU,ASADOLLAH BABAI-AHARI and ILARIA PERTOT.Biological and molecularcharacterisation of Pilidiumlythri,anemerging strawberry pathogen inIran.Phytopathologia Mediterranea,(2016)55,3,366-379分离得到。

实施例1

PDA培养基的制备：将200g马铃薯去皮、切块，煮30分钟至软烂，四层纱布过滤后、加入20g葡萄糖，20g琼脂粉定容于1L水中，于121℃高压湿热灭菌20min后凉至60℃，制成平板。

实施例2

YDA培养基的制备：酵母粉5g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，定容于1L水中，于121℃高压湿热灭菌20min后待其凉至60℃左右，制成平板。

实施例3