[实用新型]一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于免疫检测分析技术和纳米生物技术领域，特别是针对这一领域的试剂盒方面，具体涉及为一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒。

背景技术

产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia.Coli,STEC) 是一类人畜共患肠道致病菌。能引起包括水样腹泻(Diarrhea)、出血性结肠炎(Hemorrhagic Colitis,HC)，溶血性尿毒综合征(Hemolytic Uremic Syndrome, HUS)等一系列人体疾病，特别是HUS可对患者肾脏造成不可恢复的功能性损伤，病死率较高。STEC感染具有暴发性、强烈的致病性与致死性等特点，严重威胁着人类健康，是我国及世界面临的又一重大公共卫生挑战。

大量研究指出：志贺毒素(Shiga toxin,STX)是STEC主要毒力因子。该毒素分为STX1和STX2两个亚型，均由A、B二种亚基组成，一个A亚基单体与B亚基的五聚体以非共价键结合构成全毒素。其中STX2被认为是感染性溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)的主要致病原,介导了致病菌对宿主最为严重的致病过程，成为决定病人预后的关键性因素。作为引发HUS的物质基础，STXⅡ已成为诊断、治疗STEC感染及其并发症的靶向分子。用这种广谱的标志物为靶向，可建立快速、易操作、不依赖血清型的定量诊断方法，补充和丰富传统依靠病原体分离进行确诊的STEC诊断，从而大大提高对非O157 血清型STEC感染的检出率。目前以STX毒素为靶标的STEC诊断方法有免疫胶体金层析法、酶联免疫法(ELISA)等。对于STEC感染者而言，存在于病人血清或粪便中的STX毒素的量较低，用常规的ELISA灵敏度不易达到，需要更高灵敏度的检测方法以提高检出限。

基于免疫磁珠的以稀土离子螯合物作为标记物的时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)是一种高灵敏、特异、稳定的免疫检测方法，包被特异性抗体的磁珠可与含有相应抗原的靶物质特异性地结合形成免疫磁珠-抗原-稀土离子螯合物标记抗体的复合物，然后通过外加磁场，使磁珠和溶液快速分离，除拥有常规TRFIA技术优点外，经过化学基团修饰的磁性微球代替常规微孔板用于免疫分离，表面积更大，吸附作用更牢固。在短时间内将待测样品中的目标分子捕获富集，缩短反应和检测时间，进一步提高检测灵敏度，可解决传统和常规检测方法存在的费时费力，血清型依赖和灵敏度偏低等问题。

免疫磁珠结合时间分辨荧光免疫分析检测是非放射标记超微量免疫检测技术和纳米标记技术的完美结合，无放射性同位素损伤和污染，在临床检测分析中被广泛推广使用。但目前针对STXⅡ毒素检测没有此种技术现成的试剂盒，或者存在一些试剂盒，但设计不合理、试剂取用不方便同样导致在使用中给操作者带来困扰的问题，因此需要一种将各种所需试剂归类放置，设计合理，方便使用的试剂盒。

本实用新型基于现有技术中试剂盒的使用不便及设计不合理等问题，提供了一种基于志贺毒素II(STXⅡ)免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒。

实用新型内容

为了克服现有技术中试剂盒的使用不便及设计不合理等问题，本实用新型提供一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒。

一种基于STXⅡ免疫磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，包括：盒体、盒盖，其特征在于，盒体内部设有两块隔板，将盒体分隔成三个容腔；每个容腔内设置与容腔大小适配的硬质海绵，分别为海绵A，海绵B与海绵C，海绵A 上设有竖直放置96微孔板的凹槽；海绵B上设有竖直放置反应缓冲液试剂瓶，增强液试剂瓶，浓缩清洗液试剂瓶的对应试剂瓶孔；海绵C上设有竖直放置包被STXⅡ单克隆抗体的磁珠试剂瓶，铕标抗STXⅡ单克隆抗体溶液试剂瓶， STXⅡ校准品试剂瓶的对应试剂瓶孔。此种设置可以有效将不同性质的试剂进行分隔，防止取放混乱，且微孔板的竖直放置可以有效节省试剂盒的水平空间。

进一步，两个隔板水平放置，形成3个平行容腔，或者两隔板垂直设置，形成两个竖直容腔，一个水平容腔。

进一步，所述海绵A、B、C设计不同的颜色，不同颜色的设计可以方便区分，使各种试剂区分更加直观明显。