[发明专利]可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明涉及一种可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体检测试剂盒及检测方法，检测试剂盒包括磁分离试剂、抗体试剂、校准品、质控品、浓缩清洗液和底物液。本发明提供的可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)定量检测试剂盒，采用化学发光免疫技术和磁分离技术相结合的方法，大大提高了过敏原特异性抗体的检测灵敏度和特异性，使得检测结果更真实可信；同时优化了反应时间和反应步骤，使操作更简单。

技术领域

本发明涉及可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体检测试剂盒及检测方法，用于体外定量测定人血清中可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体的含量。

背景技术

尿激酶纤溶酶原激活物系统由可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)和其抑制因子组成。该系统通过蛋白水解、信号转导、趣化因子活化参与细胞外周作用、细胞迁移、血管生成、组织重建等。可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)是尿激酶型纤溶酶原激活物受体的可溶形式，在炎症等刺激下，可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)从细胞表面裂解，释放到体液中，包括血浆、尿液和脑脊液中。

近年来大量的研究证明，suPAR作为一种新型标志物，在体液中的含量变化与许多疾病的病理过程及预后评估密切相关，如特定的肿瘤和感染性疾病等。研究显示，血清中suPAR水平高，与某些肿瘤的不良预期相关，如结肠直肠癌、急性粒细胞性白血病、卵巢癌、前列腺癌、肺癌等。而suPAR作为炎症的新型标志物备受关注，其对全身炎症反应综合征的诊断由较高的敏感性和特异性；研究显示，血清中suPAR高水平与感染性疾病的不良预期相关，严重脓毒血症患者血清中suPAR水平明显高于脓毒血症患者。

目前临床多采用的ELISA方法进行suPAR含量检测，然而ELISA的非均相反应存在本底高特异性不好等缺点，检测灵敏度和准确性低，具有很大的局限性。因此，还需要开发新型的suPAR定量检测方法。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明目的在于提供一种灵敏度高、特异性强、操作简单的可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)定量检测试剂盒及其检测方法。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案为：

第一方面，本发明提供了一种可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体检测试剂盒，试剂盒包括：磁分离试剂、抗体试剂、校准品、质控品、浓缩清洗液和底物液。

抗体试剂包括碱性磷酸酶标记抗体和生物素标记抗体；磁分离试剂包括包被有链霉亲和素的磁微粒。

磁分离试剂的制备方法包括：配制磁微粒缓冲液，磁微粒缓冲液的组分包括：TRIS4.58g/L，NaCl 6.81g/L，TRITON X-100 0.5mL/L，Proclin-3000.5-1mL/L，BSA 3-5g/L，余量为水，pH值为7.95-8.05；磁微粒缓冲液优选采用0.22um微孔滤器过滤，并于2-8℃冷库贮存备用；