[发明专利]一种用于杀螨的丁香花蕾油的提取方法

权利要求书

1.一种用于杀螨的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取丁香花蕾原料，将所述丁香花蕾原料进行冷冻干燥处理；

(2)将步骤(1)处理后的丁香花蕾原料粉碎后，加入溶剂和复合酶进行酶解，得到酶解液，灭酶后过滤，收集滤液和滤渣；所述滤液经离心后得到提取液A；

(3)在所述滤渣中加入表面活性剂，然后进行加热蒸馏，收集得到冷凝液，将冷凝液离心沉淀，油水分离后得到粗产品；

(4)将所述粗产品和所述提取液A混合，经萃取后取有机相，将所述有机相蒸干后溶解于缓冲液中，得到粗提液，将所得粗提液采用大孔树脂进行吸附，然后采用洗脱液进行洗脱，得到粗提取物；

(5)将所述粗提取物采用色谱纯化，得到用于杀螨的丁香花蕾油。

2.如权利要求1所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，步骤(2)中所述复合酶包括纤维素酶、果胶酶和木聚糖酶，其中，所述纤维素酶、所述果胶酶和所述木聚糖酶的重量比为1-7:1-7:1，所述复合酶的添加重量为所述丁香花蕾原料重量的0.1％-0.5％。

3.如权利要求1所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，步骤(3)中所述表面活性剂包括C₈-C₂₀的阳离子表面活性剂、C₈-C₂₀的阴离子表面活性剂和C₈-C₂₀的非离子表面活性剂中的一种或多种，所述表面活性剂的加入重量为所述滤渣重量的0.05％-10％。

4.如权利要求3所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，所述表面活性剂包括十二烷基苯磺酸钠、吐温-80、月桂醇硫酸钠、十二烷基磺酸钠、十六烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基氯化铵和硬脂酸钠中的一种或多种。

5.如权利要求1所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，在步骤(3)和步骤(4)之间，将所述粗产品和所述提取液A中的至少一种进行高压脉冲电场处理，所述高压脉冲电场处理按照以下方法进行：

将所述粗产品和所述提取液A中的至少一种加入到等体积的乙醇中，进行高压脉冲电场处理，电场强度为15-30kV/cm，脉冲数为5-8个，离心后取上清液继续进行步骤(4)的操作。

6.如权利要求1所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，步骤(4)中，所述大孔树脂包括极性、中极性、弱极性和非极性大孔树脂中的一种或多种。

7.如权利要求6所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，所述大孔树脂为HPD500或AB-8大孔树脂。

8.如权利要求1所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，采用所述大孔树脂进行吸附的时间为1-3小时，所述大孔树脂的用量按如下比例添加：1g大孔树脂/20-50mL粗提液。

9.如权利要求1所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，步骤(5)中，所述色谱纯化的方法包括高速逆流色谱法，所述高速逆流色谱条件如下：转速为1000-1500rpm；温度为16-34℃；流速为2-5ml/min；分离溶剂为A-B-水体系，所述A为氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷或四氯甲烷；所述B为甲醇或乙醇；所述分离溶剂中，所述A的体积百分含量为20％-70％，所述B的体积百分含量为5％-60％，所述水的体积百分含量为5％-50％。

10.如权利要求1所述的丁香花蕾油的提取方法，其特征在于，步骤(1)中，所述冷冻干燥处理按照以下方法操作：

(1)测定丁香花蕾原料的共晶点，测定后装至物料盘中；

(2)将所述物料盘放入冷冻仓中，将所述冷冻仓温度调整至预冻结温度，保持1.5-3小时，所述预冻结温度为低于所述共晶点温度10-20℃的温度；

(3)将预冻结处理后的丁香花蕾原料置入真空干燥仓内进行升华干燥，所述真空干燥仓真空度维持在0.1-0.2KPa，向真空干燥仓内供热，最高温度控制在45℃，当物料温度达到设定最高温度时，停止加热；

(4)破除真空干燥仓的真空，取出丁香花蕾原料。