[发明专利]一种人的NK细胞系

说明书

本发明涉及细胞系，具体公开了一种人的NK细胞系，保藏编号为CGMCC No.14891。本发明所提供的人NK细胞系可长期传代，大量扩增，并具有较强的抗肿瘤活性，为研究者深入开展慢性活动性EBV感染疾病机理研究、筛选慢性活动性EBV感染、EBV相关淋巴细胞增殖症等治疗药物、自然杀伤细胞抗肿瘤作用机制及临床过继免疫治疗提供新的实验模型。

技术领域

本发明涉及细胞系，具体地说，涉及一种人的NK细胞系。

背景技术

自然杀伤细胞(NK细胞)是机体重要的免疫细胞，具有抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节作用。

NK细胞一直被认为是杀死癌细胞和治疗感染的绝佳武器。但是NK细胞纯化和体外大量扩增技术上存在一定难度。因此科学家试图建立细胞系，用同种异体NK细胞进行肿瘤生物治疗，国外科学家相继建立了HANK、KHYG-1、NK-92、NKL、PLT、MOTN、IMC-1、NK-YS、KAI3、SNK-1、SNK6以及YT、NK3.3等，还有通过稳定转染IL-2获得的NK-92MI、IL-2/NKL、IL-2/NK3.3等转基因NK细胞系。尤其是NK-92的建立，促进了其在肿瘤过继免疫治疗中的应用，并为深入开展研究NK细胞的特征、功能、进一步揭示它在免疫系统中的确切作用，提供了有力的研究材料。

现有技术中，公开了众多由来自鼻腔T/NK细胞淋巴瘤患者(Nagata H,Konno A,Kimura N,Zhang Y,Kimura M,Demachi A,Sekine T,Yamamoto K,Shimizu N.Blood 2001,97:708–713)及CAEBV患者的外周血单个核细胞所建立的NKT细胞系或T细胞系(HiroshiNagata,1 Tsutomu Numata,1Akiyoshi Konno,Pathology International 2001；51:778–785)。这些细胞系是用超过10mL的外周血，经过流式细胞分选后利用高浓度的细胞因子培养获得的纯化的细胞系。这类细胞系依赖高浓度的细胞因子，事先经过纯化，研究表明这类细胞不能完全代表CAEBV的发病模型(Ken-Ichi Imadome1,Misako Yajima1,Ayako Arai，et al.Plos Pathogen,2011,V7(10),e1002326)。因此，提供一种来源CAEBV患者的未经纯化的，包含患者自身感染NK和或T的细胞系，对于研究该类疾病和筛选诊断分子marker以及筛选药物具有重要意义和独特价值。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一株能长期在体外传代培养，可以大量扩增的人NK细胞系。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

一种人NK细胞系，经鉴定为人NK细胞系M296，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏日期为2017年12月4日，保藏编号为CGMCCNo.14891。

本发明所提供的人NK细胞系可长期传代，大量扩增，并具有较强的抗肿瘤活性，为研究者深入开展慢性活动性EBV感染疾病机理研究、筛选慢性活动性EBV感染、EBV相关淋巴细胞增殖症等治疗药物、自然杀伤细胞抗肿瘤作用机制及临床过继免疫治疗提供新的实验模型。

本发明所述的人NK细胞系M296，是一株源自慢性活动性EBV感染淋巴细胞增殖症病人的细胞系。

本发明进一步提供了所述细胞系在进行慢性活动性EBV感染、EBV相关淋巴细胞增殖症病人、淋巴瘤或白血病病人疾病致病机理研究方面的应用。

本发明还提供了所述细胞系在筛选诊断EBV相关淋巴细胞增殖症、淋巴瘤或白血病分子标记中的应用，以及在筛选治疗EBV相关淋巴细胞增殖症、淋巴瘤或白血病病人分子靶标中的应用。