[发明专利]一株高效降解佛波酯菌株及其在麻疯树饼粕发酵脱毒中的应用

说明书

本发明涉及一种功能性菌种，涉及一株高效降解佛波酯菌株及其在麻疯树饼粕发酵脱毒中的应用。一株高效降解佛波酯菌株，该菌是阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）的菌株Z11，该菌株于2017年9月21日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101）保藏，编号为CGMCC No.14655。本发明可以有效降低麻疯树饼粕中的有毒成分及抗营养因子含量，能够提高麻疯树饼粕的饲用价值。

技术领域

本发明涉及一种功能性菌种，涉及一株高效降解佛波酯菌株及其在麻疯树饼粕发酵脱毒中的应用。

背景技术

麻疯树(Jatropha curcas)属大戟科(Euphorbiacea)麻疯树属(Jatropha)植物，分为有毒和无毒两种基因类型，其中无毒品种仅分布在墨西哥。麻疯树的种籽是麻疯树果，其种仁含油量高达60％，是制备生物柴油的理想原料。但由于其饼粕中含有胰蛋白酶抑制剂、植物凝集素、佛波醇酯等抗营养因子和毒素，使其不能直接被用作动物饲料。目前一般将其作为废弃物丢弃，不仅造成了大量的资源的浪费，还污染了环境。近年来，由于世界范围内以麻疯树为原料生产生物柴油的研究已成为热门课题，而且其成果逐步得到推广应用，致使麻疯树制备生物柴油的副产品-麻疯树饼粕的应用受到极大的关注。与其他植物源蛋白饲料类似，麻疯树饼粕通过物理化学方法(热处理、溶剂浸出、碱处理等)也可以降低或去除其抗营养因子和毒物。物理脱毒效率低，且对饼柏中的营养成分造成一定的破坏；化学脱毒操作复杂过程繁琐、易导致化学物残留，而且脱毒范围小、成本高。

利用微生物发酵工程技术进行麻疯树饼粕的全方位脱毒，不仅可降低麻疯树饼粕的毒性，增加产品的适口性，而且还可进一步提高蛋白质含量。目前，麻疯树籽饼粕发酵主要是由棉籽粕和大豆粕发酵方法演变而来，多采用单菌或混菌固态发酵，发酵菌株多是酵母和霉菌。

发明内容

本发明提供一株高效降解佛波酯菌株，该菌种从麻疯树种根系土壤中分离获得，可进行麻疯树饼粕的发酵脱毒。

本发明的技术方案是：

一株高效降解佛波酯菌株，该菌是阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)的菌株Z11，该菌株于2017年9月21日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)保藏，编号为CGMCCNo.14655。

所述的高效降解佛波酯菌株是从四川攀枝花麻疯树种植园麻疯树根系土壤中分离筛选、纯化得到，该菌株的生物学性质如下：

形态学特征：在LB培养基平板上形成明显菌落，乳白色，圆形或稍显圆形，边缘整齐，表面光滑，有光泽，呈扁平状，中间略微凸起，不透明。革兰氏染色为阴性。显微镜下观察，菌株细胞形态为杆状。

培养特征：最适生长温度32℃(图5)，最适生长初始pH为8(图4)，兼性厌氧。生长于LB培养基中，培养基成分：NaCl 0.5g/L，蛋白胨5.0g/L，酵母膏5.0g/L。

一种所述的高效降解佛波酯菌株在麻疯树饼粕的发酵脱毒方面的应用。作为优选，采用所述的高效降解佛波酯菌株进行麻疯树饼粕的发酵脱毒方法是：采用固态发酵或液态发酵的方式，含麻疯树饼粕的底物接种菌株Z11的菌液，菌液接种量为15％-30％，在30℃条件下发酵5-7天。

一种所述的采用高效降解佛波酯菌株进行麻疯树饼粕的发酵脱毒方法，包括如下步骤：

①活化菌株：取-80℃保存的菌液加入灭菌活化培养基中，30±2℃120rpm条件下过夜培养，得到菌株Z11的菌液，活化培养基含有NaCl 0.5g/L，蛋白胨5.0g/L和酵母膏5.0g/L；

②饼粕制作：麻疯树种子干燥后压榨脱油，取脱油麻疯树饼粕，干燥后粉碎过40目筛，121℃灭菌20min；