[发明专利]一种抑制RbAp48的基因的siRNA及其抗肿瘤应用

说明书

本发明涉及一种抑制RbAp48基因的siRNA及其抗肿瘤应用，具体公开了RbAp48基因抑制剂为双链siRNA分子SEQ ID No.1和SEQ ID No.2，SEQ ID No.3和SEQ ID No.4，或SEQ ID No.5和SEQ ID No.6。还公开了其作为抗肿瘤药物以及在制备抑制肿瘤细胞增殖、或诱导细胞衰老的药物中的用途。

技术领域

本发明涉及一种抑制RbAp48基因的siRNA及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

癌症是全球第二大死因，2015年癌症死亡人数多达880万。从全球情况来看，有近六分之一的死亡是由癌症造成，其中最常见的癌症类型为肺癌，肝癌和结直肠癌等。具体来说，肺癌的发病率和死亡率都居各类癌症之首，此外肝癌也是严重危害人类健康的主要恶性肿瘤之一，其死亡率仅次于肺癌位于第2位。宫颈癌位列全球女性恶性肿瘤发病和致死人数的第四位，在我国，每年新发宫颈癌病例数约13万，居我国女性生殖系统恶性肿瘤首位。消化道肿瘤亦是最常见的恶性肿瘤之一，包括食管癌、大肠癌、胃癌等的发病率和死亡率一直位居各种癌症的前列。

目前对于肿瘤的治疗主要采取的是放疗、化疗及外科手术这三大传统方法。然而以肺癌为例，其早期多无明显症状，部分患者确诊时已属中晚期，有远处病灶转移，已失去外科手术和放疗的机会。因此，在肺癌的治疗上，药物的作用显得尤为重要。遗憾的是，目前仍然缺乏持久有效的肺癌治疗药物。对于宫颈癌，食管癌，大肠癌，胃癌及肝癌等，其放疗和外科手术治疗均存在易复发和预后差的问题。至于化疗，一般是用于放疗增敏、术前辅助治疗、晚期远处转移和复发患者的姑息治疗等。但由于一线肿瘤化疗药物均为细胞毒性药物，不仅能作用于肿瘤细胞，也能会伤及正常细胞，故其作用的特异性差，毒副作用强，临床效果差强人意。所以，寻找能选择性作用于肿瘤的精准治疗方案已成为当前科学研究的热点和难点。

Rb结合蛋白4(RBBP4或RbAp48)，因为最早发现其和Rb蛋白结合命名，近来研究发现它还参与了其他复合物的组成和功能调节，因此它又被称为染色质重塑因子、lin-53和NuRF55。RbAp48由RBBP4基因编码，位于1号染色体短臂3区5带1亚带(1p35.1)，碱基长度为35064bp，分子量为48KD。RbAp48可以参与Rb蛋白、极光激酶C对细胞周期的调节，还参与MuvB复合物的组成和功能调节，从而对细胞周期产生影响。RbAp48在Rb蛋白的招募下，通过HDAC1介导，形成Rb-HDACl-RbAp48三聚复合体，从而抑制E2F的转录启动和细胞周期的进行。同时，RbAp48参与PRC2的组成和功能调节。PRC2(Polycomb Repressive Complex 2)是转录抑制因子Polycomb复合物的成员之一，通过催化亚基EZH2的SET结构，在EED、SΜZ12的协同下，对核小体组蛋白进行甲基化修饰，RbAp48参与PRC2/EED-EZH2复合物和PCL蛋白调节H3K27me3的形成过程，从而抑制基因转录。这种基因沉默作用已被证实具有维持细胞增殖和存活、抑制细胞衰老及分化效果的作用。

RbAp48参与众多复合物的组成和功能调节，因此它的表达对表观遗传修饰相关的基因沉默、细胞周期调控、细胞增殖分化、细胞衰老等生命活动的正常进行尤为重要。有研究报道，RbAp48的异常表达与多种疾病的发生和发展有关，近年来RbAp48在肿瘤中的表达以及与肿瘤发生发展的关系越来越受到关注。RbAp48蛋白在多种肿瘤中高表达，包括宫颈癌、肺癌、甲状腺癌急性髓性白血病和多种胃肠道肿瘤。组织芯片显示，RbAp48蛋白在人肺癌，宫颈癌，结肠癌，食管癌，胃癌及肝癌细胞中的表达显著高于其癌旁细胞。因此，RbAp48可能是治疗人肺癌，宫颈癌，结肠癌，食管癌，胃癌及肝癌细胞的潜在靶点。