[发明专利]颠茄钙调蛋白AbCaM1基因及其重组植物表达载体和应用在审

专利信息
申请号: 201711310316.0 申请日: 2017-12-11
公开(公告)号: CN109837287A 公开(公告)日: 2019-06-04
发明(设计)人: 廖志华;陈敏;杨春贤;赵腾飞;强玮 申请(专利权)人: 西南大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/82;C07K14/415
代理公司: 重庆航图知识产权代理事务所(普通合伙) 50247 代理人: 王贵君
地址: 400715*** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 颠茄 基因 表达载体 东莨菪碱 钙调蛋白 重组植物 莨菪碱 根癌农杆菌介导 核苷酸序列 高效生产 基因工程 植株 应用 转入
【权利要求书】:

1.颠茄钙调蛋白AbCaM1基因在提高颠茄生物碱含量中的应用,其特征在于:所述AbCaM1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述生物碱为莨菪碱和东莨菪碱。

2.含有颠茄钙调蛋白AbCaM1基因的重组植物表达载体在提高颠茄生物碱含量中的应用,其特征在于:所述AbCaM1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述生物碱为莨菪碱和东莨菪碱。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述重组植物表达载体是将如SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列连入pBI121载体的BamH I和Sac I酶切位点处。

4.一种提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于,包括如下步骤:通过在颠茄中过量表达AbCaM1基因,所述AbCaM1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述生物碱为莨菪碱和东莨菪碱。

5.根据权利要求4所述提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于,在颠茄中过量表达AbCaM1基因的方法如下:克隆颠茄钙调蛋白AbCaM1基因,然后构建植物表达载体,获得含有颠茄钙调蛋白AbCaM1基因的重组植物表达载体,再将获得的重组植物表达载体转化根癌农杆菌获得工程菌,最后用工程菌转化颠茄,筛选抗性再生植株,生根培养,PCR筛选阳性植株,获得生物碱含量提高的颠茄。

6.根据权利要求5所述提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于:克隆颠茄钙调蛋白AbCaM1基因的方法为:以颠茄cDNA为模板,SEQ ID NO .3和SEQ ID NO .4所示序列为引物进行PCR扩增,电泳检测,回收,获得颠茄钙调蛋白AbCaM1基因。

7.根据权利要求5所述提高颠茄生物碱含量的方法,其特征在于,所述重组植物表达载体是将如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列连入pBI121载体的BamH I和Sac I酶切位点处而得。

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