[发明专利]一种检测蜜醋黑豆中染料木苷的方法

说明书

本发明公开了一种检测蜜醋黑豆中染料木苷的方法。将烘干的蜜醋黑豆粉碎，过筛得蜜醋黑豆粉，加入甲醇溶液超声，经离心后取上清液，将该上清液浓缩后，用甲醇溶液定容得染料木苷提取液；将染料木苷标准品用甲醇定容，超声处理，制成染料木苷标准母液，将染料木苷标准母液用甲醇定容，配成染料木苷标准液；将得染料木苷提取液制成稀释液，使其通过滤膜后，保存待用；将得到的样品进行含量检测，通过流动相为甲醇、冰醋酸和水，从而检测蜜醋黑豆产品中染料木苷的含量。该方法快速、简单结果可靠，方便快捷，蜜醋黑豆产品中染料木苷含量为134.234～158.321mg/kg。

技术领域

本发明属于分离纯化染料木苷技术领域，更具体地，涉及一种检测蜜醋黑豆中染料木苷的方法。

背景技术

黑豆顾名思议就是黑色的大豆，黑豆籽粒中人体所必需的5种氨基酸的含量在0.244％～2％，黑豆中脂肪含量在1％以下，含有丰富的维生素、矿物质等营养素，黑豆中含有多种微量元素，多种氨基酸、碘、硒、支链淀粉、可溶性色素等均为普通作物的数倍以上。

大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物，包含3种苷元和它们的9种B-葡萄糖苷的衍生物。大豆异黄酮中97％～99％是以大豆异黄酮糖苷形式存在，苷元形式仅为大豆异黄酮总量的1％～3％。大豆异黄酮具有弱雌激素活性、抗氧化活性、抗溶血活性和抗真菌活性，能有效地预防和抑制白血病、骨质疏松、结肠癌、肺癌、胃癌、乳腺癌和前列腺癌、妇女更年期综合症等多种疾病的发生，尤其是对乳腺癌和前列腺癌有良好的预防和治疗作用。

大豆异黄酮类化合物包括多种化学结构和生物功能高度多样的成员，例如黄豆黄素、芒果苷、大豆苷和染料木苷等。从大豆中提取的大豆异黄酮主要成分是染料木苷，其化学结构式见式(1)。染料木苷是大豆异黄酮的有效成分之一，结构上属于植物雌激素。研究发现染料木苷不能被机体直接吸收，而是经肠道菌中酶水解后以染料木黄酮的形式吸收，发挥生物活性。染料木黄酮在很多方面活性都大于黄豆苷元。

目前，关于染料木苷的药理学活性研究已有较多报道，但对其黑豆制品中染料木苷检测方法的总结与展望尚显不足。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的缺陷，提供一种检测蜜醋黑豆中染料木苷的方法。该方法采用甲醇超声辅助提取法提取蜜醋黑豆中的染料木苷，并利用超高效液相色谱法仪对其含量进行检测的方法，经蜜醋黑豆提取液制备、标准溶液制备、样品溶液制备和超高效液相色谱仪检测等步骤得出蜜醋黑豆中染料木苷的含量。

本发明上述目的通过以下技术方案予以实现：

一种检测蜜醋黑豆中染料木苷的方法，包括以下具体步骤：

S1.蜜醋黑豆提取液制备：将烘干的蜜醋黑豆粉碎，过筛得蜜醋黑豆粉，加入甲醇溶液A超声，经离心后取上清液，将该上清液浓缩后，用甲醇溶液B定容得染料木苷提取液；

S2.染料木苷标准溶液配制：将染料木苷标准品用甲醇溶液C定容，超声处理，制成染料木苷标准母液，将染料木苷标准母液用甲醇溶液C定容，配成染料木苷标准液；

S3.样品溶液的制备：将步骤S1所得染料木苷提取液用甲醇溶液C制成稀释液，使其通过滤膜后，保存待用；

S4.超高效液相色谱仪检测：将步骤S3得到的样品进行含量检测，通过流动相为分析纯甲醇、冰醋酸和水，检测蜜醋黑豆产品中染料木苷的含量。

优选地，步骤S1中所述烘干的温度为60～80℃，所述超声的温度为60～65℃，超声所述筛的孔径为40～60目，所述超声的时间为20～40min，所述离心的速率为8000～12000r/min，所述离心的时间为8～12min。

优选地，步骤S1中所述甲醇溶液B的浓度为8～12％，所述染料木苷提取液的浓度为0.8～1.2％。