[发明专利]一种表皮生长因子活性肽及其制备与应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种表皮生长因子活性肽及其制备与应用：与天然产生的人体表皮生长因子具有相同作用且与天然产生的EGF相比具有更高的稳定性和皮肤渗透性的肽；采用化学合成的方法合成活性肽；表皮生长因子活性肽在延缓表皮细胞衰老的药物、食品或保健品中的应用；延缓衰老的保健品，能够促进细胞中产生自分泌EGF，促进表皮组织上皮细胞、角质细胞、成纤维细胞等多种细胞的生长、分裂，加快新陈代谢，增强其表皮细胞活性，从而使细胞保持质与量的完善。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种表皮生长因子活性肽及其制备与应用。

背景技术

表皮生长因子(EGF)是一类重要的生长因子，是类EGF大家族的一个成员。它是由50-60个氨基酸分子组成的肽链，链中含有6个半胱氨酸分子，半胱氨分子间形成稳定的双硫键。使整条肽链成为三个环联部分的活性物质。它是1962年科恩博士在一次实验中偶然发现的。

它是一种广泛存在于人或其它动物体内的小分子多肽，极微量即能强烈刺激细胞生长、抑制衰老基因的出现，延缓表皮细胞衰老。他通过与其受体相结合发挥作用。

表皮生长因子通过与细胞表面的受体表皮生长因子受体(EGFR)结合而起作用。与表皮生长因子受体的高亲和力结合，激发受体内在的酪氨酸激酶的活性，从而启动了信号传导级联而导致多种生物化学变化，细胞内钙水平上升，增加糖酵解与蛋白质合成,增加某些基因(包括表皮生长因子受体)的表达，最终导致DNA合成和细胞增殖。

20世纪80年代初，中国就已将表皮生长因子应用于创伤治疗中，效果显著。进入到21世纪初，美国(FDA、SFDA)将表皮生长因子列入药典后，又兴起基因工程、(克隆)人工重组产业化、规模大投资高。但单纯的表皮生长因子医学临床应用效果不稳定，用量不易控制。

大多数血液和组织中存在的多肽生长因子具有短至几分钟的体内半寿期。很可能，EGF显示出差的结构稳定性。另外，因为EGF是生物学不稳定的和生理化学异质的，所以它可能显示降低的治疗功效。其皮肤渗透性极差。因此，依旧需要开发出具有改善的稳定性和皮肤渗透能力并且具有EGF固有活性的新物质。

发明内容

本发明的目的就是为了提供一种表皮生长因子活性肽Cys-Met-Tyr-Ile-Glu-连接体-Arg-Gly-Asp及其制备与应用。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

本发明第一方面，提供一种生物活性肽，其氨基酸序列为Cys-Met-Tyr-Ile-Glu-连接体-Arg-Gly-Asp，其中，所述连接体由Gly(n)表示，且n为2-10的整数。

较优的，所述生物活性肽具有刺激细胞生长、抑制衰老基因的出现，延缓表皮细胞衰老的功能。

为了开发出与天然产生的人表皮生长因子具有相同作用且与天然产生的EGF相比具有更加提高的稳定性和皮肤渗透性的肽，制备方法如下：

开发策略：首先，将本发明的肽设计包含两个区域，EGF衍生的序列(即EGF活性区域)和细胞附着区域。EGF活性区域选自天然产生的EGF氨基酸序列中。为了提高本发明的肽的EGF活性，细胞附着区域选自细胞外基质蛋白之一的纤连蛋白。

最终选择的EGF活性区域包含氨基酸序列“Cys-Met-Tyr-Ile-Glu”，最终选择的细胞附着区域包含氨基酸序列“Arg-Gly-Asp”。此外，与直接连接相比，优选经由连接体间接连接两个区域。

使EGF活性区域和细胞附着区域互相连接的连接体包括本领域技术人员可利用的任何连接体。优选地，所述连接体包含多个氨基酸。本发明中适合的连接体包含具有不带电侧链的氨基酸，优选为Gly或者Gly或Ser。优选地，所述连接体的长度为2～18个氨基酸残基。更优选地，所述连接体包含2～10个Gly残基。由氨基酸残基(特别是Gly残基)组成的连接体有助于本发明的肽的稳定性。