[发明专利]一种防治松材线虫的生物农药及其制备方法

权利要求书

1.一种防治松材线虫的生物农药，其特征在于，该农药的剂型为粉剂，该粉剂的活性成分为绿木霉（Trichoderma virens）T43发酵液正丁醇提取物；所述绿木霉（Trichoderma virens）T43的保藏编号为：CGMCC No: 14622；

该粉剂是通过将绿木霉T43发酵液过滤、离心，取上清液，加正丁醇混合萃取，弃水层，将正丁醇层蒸发浓缩得到的；

所述粉剂经浓度为0.5%~2.0%（V/V）吐温80溶液溶解后可用于防治松材线虫；

所述粉剂经吐温80溶解后得到的体积为原发酵液过滤液体积的1/10。

2.根据权利要求1所述的一种防治松材线虫的生物农药的制备方法，其特征在于，该方法是将绿木霉T43发酵液过滤、离心，取上清液，加正丁醇混合萃取，弃水层，将正丁醇层蒸发浓缩得到生物农药粉剂。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述绿木霉T43接种到改良PDA培养基上，改良PDA培养基按比例组成为：马铃薯180-220 g，葡萄糖18-22 g，硫酸镁1-2 g，磷酸二氢钠2-4 g，琼脂18-22 g，水1000 mL，制作1 L液体，分别装于500 mL的锥形瓶中，每瓶大约装250 mL，将装有培养基的锥形瓶放入高压灭菌器中，于118-124℃下灭菌18-22 min，待冷却后，取出绿木霉（Trichoderma virens）T43，接种到PDA培养基中，放置于25℃恒温培养箱中数日。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述绿木霉T43接种在改良的PD液体培养基，PD液体培养基配方为：马铃薯180-220 g，葡萄糖18-22 g，硫酸镁1-2 g，磷酸二氢钠2-4 g，水1000 mL，分别装于250 mL液体培养基的锥形瓶中，在超净工作台中用直径为5 mm无菌打孔器，打孔之后将在培养皿中培养好的绿木霉（Trichoderma virens）T43接种于250mL液体培养基的锥形瓶中，每瓶接3-4片菌饼，之后放于摇床，于25℃、150 r/min条件下振荡培养10 d 。