[发明专利]一种血源酶解肽在制备抑制动物肠道炎症药物中的应用

说明书

本发明提供了一种血源酶解肽在制备抑制动物肠道炎症药物中的应用，具体是以猪血为原材料，经研磨、酶解、抽滤、离心、超滤等过程纯化后，获得具有抑制动物肠道炎症作用的生物活性肽。干燥后的活性肽为薄层、粉末、颜色较浅的粉末状。该生物活性肽通过对小鼠肠道炎症的抑制作用判断具有抑制肠道炎症的作用，可作为饲料、饲料添加剂、药物辅料等。本发明抑制肠道炎症的血源酶解肽是一种无毒性无副作用，不会在动物体内残留，具有显著经济社会贡献。本发明将会推动活性肽生物产品在医药行业和饲料行业的快速发展。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及了一种血源酶解肽在制备抑制动物肠道炎症药物中的应用。

背景技术

我国每年生产大量肉类食品，包括畜禽类、水产类食品，造成我国动物类食品不安全的主要因素是兽药的残留严重超标问题。在畜禽养殖过程中，不法分子无视国家法令在畜禽饲料中添加瘦肉精，而对人体造成危害；在畜禽养殖过程中，为预防或治疗疾病为使用抗生素如氯霉素、土霉素等，虽能有效地防腐及抗菌作用，但此药物在动物体内的残留，摄入人体后，有的在体内根本无法代谢掉，致癌，对人体造成严重危害。可是，现代养殖趋向于高密度、集约化养殖，导致养殖体更易于生病，进一步加剧药残问题。而用酶解肽——来自于血源的酶解肽作为抑制动物肠道炎症的药物，迄今尚未见文献报道。因此，研制抑制动物肠道炎症的生物活性肽及其应用具有十分重要的意义与价值。

本发明通过合适的酶解纯化方法得到血源小肽或者蛋白混合物，再验证提取酶解物的存在活性与否去比所模拟合成的目标肽，并通过对小鼠动物肠道的炎症的抑制作用确认其具体活性。因此开发一种抑制动物肠道炎症的血源酶解肽具有重要的经济和社会效益。

发明内容

本发明涉及一种血源酶解肽在制备抑制动物肠道炎症药物中的应用。运用猪血为原料，确定最佳的酶解时间和酶用量。建立C57BL/6小鼠的DSS急性肠道炎症模型，通过对小鼠的体重变化、粪便状态、肠道状态、肠道黏膜损伤情况、炎症因子等指标来测定其对肠道炎症的抑制作用。该血源蛋白酶解肽无毒性无副作用，在对动物肠道炎症的抑制方面有一定作用，具有广阔的应用前景。所述的血源酶解肽应用于饲料添加剂、药物辅料。

为实现此目的，本发明采用如下技术方案：

运用血源蛋白酶解肽的方法，以猪血为原材料，先将猪血加入磷酸盐缓冲液，然后加入食品级蛋白酶酶解，离心过滤，超滤，得滤液，冷冻干燥得到血源蛋白酶解肽。

一种抑制动物肠道炎症的血源酶解肽的制备，其具体制备步骤如下：

1)将猪血添加到磷酸盐缓冲液（PBS），pH值为7.2-7.4，其中猪血的重量是缓冲液体积的9%；

2)加入胰蛋白酶和胃蛋白酶，按照1:1的比例加入到上述的猪血混合液中，其总加入质量是猪血质量的3%；

3)酶解条件是：37℃，转速为150r/min，酶解时间为6小时；

4)酶解液离心过滤，取上清液， 上清液真空抽滤，所得滤液再进行0.22um水系膜过滤，两次过滤后的酶解上清液，用超滤离心管（孔径为3000Da）得3000Da以下的过滤液，再经过真空冷冻干燥机中冷冻干燥，获得血源酶解肽。

本发明的显著优点是：本发明所涉及一种抑制动物肠道炎症血源酶解肽的应用，显著特点归结如下：

1）在医药和饲料方面，抗炎症血源酶解肽的筛选为新药合成的研发奠定基础，尤其是现今社会中越来越多的人对抗生素的使用越来越普遍，某些病原微生物对抗生素的耐药性也越来越高；过多的抗生素使用会对动物和人造成危害；

该活性肽具有显著地抑制肠道炎症的功能，且对动物无毒无副作用，不会在动物体内富集，其本身还可以参与新陈代谢，当摄取到人体后不会造成危害。

附图说明

图1是PBS、血源酶解产物、血源粉末和诺氟沙星小鼠体重变化比较。