[发明专利]高效液相色谱法测定阿哌沙班杂质含量的方法

说明书

本发明涉及一种高效液相色谱法测定阿哌沙班杂质含量的方法，属于化学检测领域。

背景技术

阿哌沙班是一种Xa因子抑制剂，适用于预防和治疗血栓的药品。阿哌沙班于2011年在欧盟27国及冰岛、挪威，率先批准用于择期髋关节或膝关节置换手术成人患者静脉血栓症的预防；2013年1月获得中国国家食品药品监督管理局颁发的进口药许可证，2013年4月正式在中国上市。是一种具有新型作用机制的抗凝药物。临床试验结果证实, 阿哌沙班显著减少主要终点-所有VTE/全因死亡复合终点的发生率，以及重大的VTE终点事件-近端深静脉血栓（DVT）,非致死性肺栓塞（PE）及VTE相关死亡的复合终点的发生率,具有较好的安全性及耐受性。

但是利阿哌沙班的杂质的含量对阿哌沙班的质量及用药安全有很大的影响，为控制质量，本文建立了测定阿哌沙班杂质体含量的方法。

因此，本研究采用高效液相色谱法,建立了一种阿哌沙班原料药中杂质的测定方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、快速，测定结果准确可靠的阿哌沙班原料药中杂质的测定方法，来解决杂质含量的检测方法。

本发明采用的技术方案为：高效液相色谱法测定阿哌沙班原料药中杂质含量，其创新点在于：包括样品配制、样品测定和结果计算步骤；所述样品配制步骤如下：

（1）样品溶液配制：取本品50mg，精密称定，置50ml 量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。必要时超声。

（2）杂质储备溶液配制：取BMS-591455(羧酸杂质)对照品及BMS-719288(甲酯杂质)对照品，各25 mg，精密称定，置25mL 量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液1mL，置20mL量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。

（3）系统适用性溶液配制：取阿哌沙班对照品50mg，精密称定，置50mL量瓶中，并精密量取杂质贮备液1mL，置此50mL量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。必要时需超声。

（4）空白溶液（稀释液）配制：30mmol/L 乙酸铵水溶液：乙腈=6：4（v/v）。

（5）对照品储备溶液：取阿哌沙班对照品50mg，精密称定，置50mL量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀。必要时超声。

（6） 对照品溶液：精密量取对照贮备液1.0mL，置50mL量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液1.0mL，置20mL量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。

所述的样品测定步骤为选用Agilent 1200具自动进样器的高效液相色谱仪（配DAD检测器）；Inertsil ODS-3V，5μm，250×4.6mm色谱柱；40℃柱温；10μl进样量；280nm检测波长；1.5ml/min流速；32min运行时间；30mmol/L 乙酸铵水溶液：乙腈流动相系统；所述含量测定步骤为以外标法计算样品中杂质的含量。

有益效果：一种高效液相色谱法测定阿哌沙班杂质含量的方法，操作简单、快速，测定结果准确可靠，从而能有效地控制该药的质量。

具体实施方式：

下面的实施列可以使本专业技术人员更全面的理解本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。

实施例1

本发明方法专属性试验：

通过进样含有所有潜在杂质的供试品溶液作为专属性溶液，考察方法的专属性。通过专属性试验确定各潜在杂质在该测定条件下的相对保留时间、分离度，确保所关注的杂质能够被检测，确保空白溶液在阿哌沙班及杂质保留时间处无干扰，确保阿哌沙班峰的峰纯度是纯的。

结果：空白溶液中，杂质及阿哌沙班峰保留时间处无干扰峰；专属性溶液中，所有峰应与已知杂质及阿哌沙班峰分离，各已知杂质及阿哌沙班峰与其相邻峰的分离度≥1.5；降解条件下的供试品溶液中，两个最近已知杂质间的分离度≥1.0，阿哌沙班峰与相邻峰的分离度≥1.5，杂质与含量结果应物料平衡。用DAD检测器检测利格列汀的峰纯度，是纯的。

专属性溶液

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强制降解实验

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实施例2

本发明方法的系统适用性试验：