[发明专利]一种华美牛肝菌多糖BSF-X及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种华美牛肝菌多糖BSF‑X及其制备方法与应用，华美牛肝菌多糖是主要由β‑D–葡萄糖和α‑D–半乳糖组成，比例为2：1，平均分子量约为141309Da，具有(1→4)‑β‑D–葡萄糖的主链，6‑O上连接一个→1,6)‑α‑D–半乳糖的侧链，侧链的半乳糖2‑O上连接一个→4)‑β‑D–葡萄糖。华美牛肝菌多糖具有较强的免疫调节活性，能显著或者非常显著地促进B、T和Raw264.7三种免疫细胞的增殖；BSF‑X能促进细胞的增殖；提高巨噬细胞释放免疫因子IL‑23和TNF‑α；在体外对L929细胞有相当显著的抑制作用；体内也能抑制S180肿瘤的生长。

技术领域

本发明属于真菌多糖研发技术领域，具体地说，涉及一种华美牛肝菌多糖BSF-X及其制备方法与应用。

背景技术

多糖(polysaccharides)或者多聚糖，是普遍存在于生物体内的一类生物大分子，常与细胞骨架的构成和组成多种内源性生物活性分子有关。近代生物化学一直把多糖视作生物体内维持细胞结构(如纤维素和几丁质)和提供能量来源(如淀粉和糖元)的物质，没有给予足够的重视。多糖的发展较蛋白质、核酸晚得多，加上多糖本身的复杂性和多样性，对多糖结构测定、表征鉴定都提出了巨大挑战。目前，对多糖的研究明显不及蛋白质和核酸的研究。

近20年来，有许多关于多糖生物活性的研究报道，尤其是在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化和降血糖等方面。

华美牛肝菌，拉丁学名为Boletus speciosus Frost，隶属担子菌亚门，层菌纲，伞菌目，牛肝菌科，牛肝菌属；又称小美牛肝菌和粉盖牛肝菌，是一种美味的可食用的大型真菌。华美牛肝菌菌盖半球形，淡土黄色，有细绒毛，不粘，边缘常呈波浪状。菌肉淡黄色，菌管与菌柄离生，菌柄具网纹。孢子椭圆形，淡绿黄色。BSF常常丛生或散生于夏秋季的林中地上。

目前，对华美牛肝菌多糖BSF-X的精细结构与免疫活性和抗肿瘤研究及其应用尚未见任何报道。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种华美牛肝菌多糖BSF-X及其制备方法与应用。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种华美牛肝菌多糖BSF-X，主要由β-D–葡萄糖和α-D–半乳糖组成，它们的组成比约为2：1，平均分子量为141309Da，由(1→4)-β-D–葡萄糖连接的主链，6-O上连接一个→1,6) -α-D–半乳糖的侧链，半乳糖2-O上连接一个→4)-β-D–葡萄糖，华美牛肝菌多糖BSF-X的结构式为：

本发明公开了一种上述的华美牛肝菌多糖BSF-X的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、将粉碎后的华美牛肝菌子实体粉末和蒸馏水混合，在水浴中蒸煮，蒸煮3次，收集上清液浓缩；

步骤2、在步骤1中制备得到的浓缩液中加入无水乙醇形成絮状沉淀物，收集沉淀并干燥得到华美牛肝菌多糖的粗提物；

步骤3、运用阴离子交换柱层析法对粗提物进行分离纯化和洗脱处理，收集洗脱液并经HPGPC法检测纯度后，制备得到华美牛肝菌多糖BSF-X。

进一步地，步骤1中的华美牛肝菌子实体粉末和蒸馏水的体积比为1： 2-5。

进一步地，步骤1中的水浴的温度为100℃；煮沸时间为3-6小时。

进一步地，步骤2中的浓缩液与无水乙醇的体积比为1:3-1:5。

进一步地，步骤3中的洗脱条件为：用电子天平准确称量50.00g纤维素装柱，配制0.12mol/L NaCl溶液进行洗脱。

本发明还公开了一种华美牛肝菌多糖BSF-X在制备免疫调控药物中的应用。

本发明还公开了一种华美牛肝菌多糖BSF-X在制备抗肿瘤药物中的应用。