[发明专利]一种凝胶清洗法纯化果胶的方法

说明书

本发明公开了一种凝胶清洗法纯化果胶的方法，旨在提供一种操作简单、产品纯度高、易于工业化生产的果胶纯化方法；其技术要点是：(1)果胶溶于去离子水中形成溶液；(2)果胶溶液进行微滤膜过滤；(3)果胶溶液中加入酸溶液调节pH值形成酸凝胶，快速搅拌将凝胶打碎并进行搅拌清洗。清洗结束后减压抽滤去除水分，加入碱溶液调pH至溶解凝胶形成浓溶液；(4)果胶溶液加入无水乙醇进行沉淀；(5)果胶沉淀进行常压干燥。

技术领域

本技术涉及生物制药领域，具体涉及一种果胶纯化方法。

背景技术

果胶是一种天然多糖高分子聚合物，分子量在5-30万之间，主链是D-半乳糖醛酸经α-1,4糖苷键连接而成的长链结构，侧链是由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和木糖等组成的短链结构。果胶为白色至红褐色粉末，具有无色无味、无固定熔点和溶解度等性质，不溶于乙醇等有机溶剂，溶于热水，微溶于冷水。果胶是人体第七大营养素膳食纤维的主要成分，具有多种食用和药用价值，因此在食品、医药等领域具有广泛的应用。

目前市场上销售的商品化果胶是苹果果胶和柑橘果胶，是食品级果胶，纯度不高，杂质较多，由于杂质较多不能直接在医药领域应用，需要进行纯化后才能在医药及组织工程领域应用。苹果果胶是从苹果渣中提取的，苹果渣的成分非常复杂，包括蛋白质、多肽、氨基酸、单糖、多糖、纤维素、半纤维素、挥发油和油脂、有机酸、多酚、内酯、黄酮、维生素以及矿物质等，提取果胶时如果这些成分去除不彻底，则有可能残留在果胶中形成杂质。由于果胶中杂质的成分复杂，纯化难度较大。目前果胶纯化方法主要是乙醇纯化和树脂纯化，乙醇纯化方法只能去除脂溶性杂质，水溶性杂质不能去除，并且乙醇用量大成本较高，而树脂纯化方法处理量较小，并且成本较高，因此本发明采用凝胶清洗法纯化果胶，旨在提供一种操作简单、产品纯度高、易于工业化生产的果胶纯化方法。

发明内容

本发明的目的是开发一种操作简单、产品纯度高、易于工业化生产的果胶纯化方法。

一种凝胶清洗法纯化果胶的方法，其特征在于，依次包括如下步骤：

(1)果胶溶解

称取一定量的苹果果胶在搅拌条件下加入到去离子水中溶解，果胶质量浓度为0.5-4％，搅拌转速为500-1500rpm，温度为20-80℃，搅拌时间1-4h；

(2)果胶溶液微滤

果胶完全溶解后进行微滤膜过滤，过滤温度为20-80℃，溶液pH值为2.5-9；

(3)凝胶清洗

过滤后的果胶溶液中加入酸溶液调节pH至1-2形成酸凝胶，快速搅拌将凝胶打碎，搅拌清洗时间为1-4h，温度为20-60℃，清洗次数为1-4次。清洗结束后减压抽滤去除70-90％体积的水分，加入碱溶液调pH至6-7溶解凝胶形成浓溶液；

(4)乙醇沉淀

将步骤(3)中的果胶浓溶液加入无水乙醇进行沉淀，乙醇体积终浓度为50-90％，醇沉温度为2-30℃，优选温度为4-10℃；

(5)产品干燥

果胶沉淀进行常压干燥，干燥温度为30-80℃，优选温度为40-60℃。

步骤2中所述的果胶溶液微滤为，依次通过3种孔径的微滤膜过滤，孔径为0.8μm、0.45μm和0.22μm。

步骤3中所述的酸溶液浓度为0.5M-2M，优选1M的盐酸、醋酸、柠檬酸、硫酸等的一种或两种以上；加入酸溶液后快速搅拌将凝胶打碎，溶胶中的可溶性物质溶于水中。

所述碱溶液浓度为0.5M-2M，优选1M的氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾等的一种或两种以上。

步骤4中所述的果胶浓溶液质量浓度为5-20％。