[发明专利]一种复合的果胶纯化方法

说明书

本发明公开了一种复合的果胶纯化方法，其技术要点是：(1)果胶溶于去离子水中形成溶液；(2)果胶溶液进行微滤膜过滤；(3)过滤后的果胶溶液中加入碱性氧化铝吸附剂进行吸附；吸附结束后依次经过离心和过滤去除吸附剂；(4)果胶溶液中加入1M的HCl溶液调节，快速搅拌将凝胶打碎，并进行凝胶清洗；清洗结束后减压抽滤去除水分，加入NaOH溶液调pH溶解凝胶形成浓溶液；(5)果胶溶液加入无水乙醇进行沉淀；(6)果胶沉淀进行常压干燥。

技术领域

本技术涉及生物制药领域，具体涉及一种复合的果胶纯化方法。

背景技术

果胶是一种含有几百到成千个结构单元的线性多糖，其平均分子量在5-30万之间。果胶主要是由α-1,4-糖苷键联接而成的半乳糖醛酸与鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖等其他中性糖相联结的聚合物，其主链是D-半乳糖醛酸形成的长链结构，侧链是由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和木糖等组成的短链结构。果胶为白色至红褐色粉末，具有无色无味、无固定熔点和溶解度等性质，不溶于乙醇等有机溶剂，溶于热水，微溶于冷水。果胶是一种增稠剂与稳定剂，目前已被广泛应用于食品工业中，在果酱、果汁中添加果胶可使其在运输过程中不变形，同时还可以增加香味及减少脱水收缩；在生产果汁饮料、浓汁时添加果胶可以稳定溶液中的悬浮油性乳酸，使果汁具有新鲜风味；在乳类制品中添加果胶可起到稳定和保鲜的作用，还可以防止酪蛋白凝结及延长酸性奶制品的饮用期限。果胶的食物纤维是维持人体健康的重要物质，具有增强胃肠蠕动促进营养吸收的功能，对防治高血压、肠癌、尿病、肥胖症等病症有良好的疗效，同时是果胶还是重金属的解毒剂。

目前市场上销售的商品化果胶是苹果果胶和柑橘果胶，它们都是食品级果胶，纯度不高，杂质较多，由于杂质较多不能直接在医药领域应用，需要进行纯化后才能在医药及组织工程领域应用。苹果果胶是从苹果渣中提取的，苹果渣的成分非常复杂，包括蛋白质、多肽、氨基酸、单糖、多糖、纤维素、半纤维素、挥发油和油脂、有机酸、多酚、内酯、黄酮、维生素以及矿物质等，提取果胶时如果这些成分去除不彻底，则有可能残留在果胶中形成杂质。由于果胶中杂质的成分复杂，纯化难度较大。目前果胶纯化方法主要是乙醇纯化和树脂纯化，乙醇纯化方法只能去除脂溶性杂质，水溶性杂质不能去除，并且乙醇用量大成本较高，而树脂纯化方法处理量较小，并且成本较高。由于苹果果胶成分复杂，单一方法很难将杂质完全去除，因此本发明采用吸附结合凝胶清洗法纯化果胶，旨在提供一种操作简单、产品纯度高、易于工业化生产的果胶纯化方法。

发明内容

本发明的目的是开发一种操作简单、产品纯度高、易于工业化生产的果胶纯化方法。

一种复合的纯化果胶的方法，其特征在于，依次包括如下步骤：

(1)果胶溶解

称取一定量的苹果果胶在搅拌条件下加入到去离子水中溶解，果胶质量浓度为0.5-4％，搅拌转速为500-1500rpm，温度为20-80℃，搅拌时间1-4h。

(2)果胶溶液微滤

果胶完全溶解后依次进行孔径为0.8、0.45和0.22μm的微滤膜过滤，过滤温度为20-80℃，溶液pH值为2.5-9。

(3)吸附剂吸附

过滤后的果胶溶液中加入吸附剂进行吸附，吸附剂用量与果胶干重比为0.5-4:1，吸附温度为20-60℃，吸附操作次数为1-4次，吸附时间为0.5-4h。吸附结束后依次经过离心和过滤去除吸附剂。

(4)凝胶清洗

过滤后的果胶溶液中加入酸溶液调节pH至1-2形成酸凝胶，快速搅拌将凝胶打碎，搅拌清洗时间为1-4h，温度为20-60℃，清洗次数为1-4次。清洗结束后减压抽滤去除70-90％体积的水分，加入碱溶液调pH至6-7溶解凝胶形成浓溶液。

(5)乙醇沉淀