[发明专利]一种基于纳米复合物的环丙沙星比率荧光探针的制备方法

权利要求书

1.一种基于纳米复合物的环丙沙星比率荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：

(1)制备硅量子点：0.5克乙二胺四乙酸二钠加入10毫升通氩气饱和的二次蒸馏水中，再加入2毫升3-氨基丙基三乙氧基硅烷，磁力搅拌充分混合10分钟，混合液转至反应釜中，在160℃下反应40分钟，产物冷却至室温，采用孔径为0.2微米的微滤膜过滤，滤液采用截留分子量1000道尔顿的透析袋透析处理以清除残余未反应实验原料，将透析袋中溶液倒出，旋转蒸发去除90％溶剂，然后冷冻干燥得到硅量子点干样，研磨成粉末备用；

(2)制备碳量子点：将0.1克苯二胺和1毫升质量浓度85％的磷酸加入40毫升二次蒸馏水中，混合物转至反应釜中在180℃下反应4小时，产物冷却至室温，采用孔径为0.2微米的微滤膜过滤，滤液采用截留分子量1000道尔顿的透析袋透析处理以清除残余未反应实验原料，将透析袋中溶液倒出，旋转蒸发去除90％溶剂，然后离心分离，用乙醇洗涤，真空干燥得到碳量子点备用；

(3)制备碳量子点/硅量子点纳米复合物：将步骤(1)制备的硅量子点溶于10毫升二次蒸馏水中，加入20毫克氮-羟基琥珀酰亚胺和20毫克1-乙基-3-(3-二甲基氨)丙基-碳二亚胺盐酸钠，在室温下磁力搅拌30分钟，充分混合后加入溶解了步骤(2)制备的碳量子点的水溶液10毫升，在避光处搅拌反应6小时，反应结束后再分别采用离心分离、乙醇洗涤和真空干燥处理，得到碳量子点/硅量子点纳米复合物；

(4)制备改性的纳米复合物：将步骤(3)制得的纳米复合物分散在10毫升二次蒸馏水中，加入10毫克双(3-吡啶甲基)胺，5毫克氮-羟基琥珀酰亚胺和5毫克1-乙基-3-(3-二甲基氨)丙基-碳二亚胺盐酸钠，在室温下磁力搅拌反应6小时，反应结束后再分别采用离心分离、乙醇洗涤和真空干燥处理，制得改性的纳米复合物；

(5)将步骤(4)制得的改性纳米复合物配制成水溶液，在室温和缓慢磁力搅拌下，在水溶液中加入氯化铜形成均质溶液，然后再加入环丙沙星，继续搅拌10分钟形成改性纳米复合物与铜离子的均质溶液；

(6)测定不同的环丙沙星摩尔浓度下，改性纳米复合物与铜离子均质溶液的荧光发射光谱，拟合硅量子点与碳量子点荧光发射峰强度比率与环丙沙星摩尔浓度之间的线性关系，构建成环丙沙星比率荧光探针。

2.根据权利要求1所述的一种基于纳米复合物的环丙沙星比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的硅量子点尺寸为1～5纳米。

3.根据权利要求1所述的一种基于纳米复合物的环丙沙星比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的碳量子点尺寸为1～5纳米。

4.根据权利要求1所述的一种基于纳米复合物的环丙沙星比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的碳量子点与硅量子点的质量浓度比为1:1～1:10。

5.根据权利要求1所述的一种基于纳米复合物的环丙沙星比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述的改性纳米复合物质量浓度为1～10毫克/毫升，氯化铜摩尔浓度为0.1～150微摩尔/升，环丙沙星的摩尔浓度为0.1～150微摩尔/升。

6.根据权利要求1所述的一种基于纳米复合物的环丙沙星比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(6)中所述的检测环丙沙星的浓度范围为0.1～150毫摩尔/升，环丙沙星的检测极限为0.1～1毫摩尔/升。