[发明专利]D‑二聚体量子点荧光检测试剂卡、试剂盒及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及荧光免疫层析领域，具体涉及D-二聚体量子点荧光检测试剂卡、试剂盒及其用途。

背景技术

D-二聚体是交联纤维特异性降解产物，也是继发性纤溶特有代谢产物。D-二聚体是在各种病理或生理状态下，凝血系统激活导致凝血活酶将纤维蛋白原转化成纤维蛋白体，并在活化因子XIII的作用下形成交联纤维蛋白。D-二聚体是交联纤维蛋白在纤溶酶讲解过程中所释放碎片进一步降级产生的含有γ链的片段。受到病理因素影响，机体凝血及纤溶动态平衡遭到破坏，凝血倾向不断增加，从而导致纤维蛋白降解产物增加。因此，D-二聚体含量升高，表明机体内存在纤维蛋白血栓形成和纤溶发生，临床上也将D-二聚体含量的变化作为机体高凝状态与纤溶亢进状态的分子标志物。

D-二聚体的检测是临床对继发性纤溶灵敏度较高、特异性强的检验项目，是目前判断机体高凝状态和鉴别原发性与继发性纤溶、观察溶栓治疗效果等方面有重要临床价值的指标。D-二聚体的检测有重大的临床应用价值：可用于弥漫性血管内凝血(DIC)的早期诊断，深静脉血栓(DVT)及肺栓塞的筛查，急性脑梗死的早期诊断、治疗和愈后观察，肝病的治疗和诊断及对恶性肿瘤的疗效和愈后观察等。

因此，对D-二聚体的快速、全面、准确、特异检测显得尤为重要。

现有技术中的免疫诊断试剂，无论是定性还是定量试剂，都是以免疫反应为基础原理，即以抗原和抗体在一定条件下发生特异性结合而产生抗原-抗体复合物，用示踪物标记抗原或抗体，来最终实现对反应产物的检测分析。

现有技术中，免疫诊断试剂卡，设置一条测试线，根据测试线的颜色来确定样本中是否含有目标抗原。通过一条测试线的颜色进行判断，容易受到环境光亮度和色彩的影响，并且也受用户主观判断的影响，产生较大误差，使得检测结果，特别是定量检测结果准确度较低，为疾病的诊断带来障碍。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种D-二聚体量子点荧光检测试剂卡、试剂盒及其用途，以降低检测误差，提高检测结果的准确度。

第一方面，本发明提供了一种D-二聚体量子点荧光检测试剂卡，包括依次排列的加样垫片、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜和吸水垫片；其中，所述玻璃纤维素膜上含有量子点-第一抗D-二聚体抗体和量子点-测试抗原；所述硝酸纤维素膜上依次设置有第一测试线、第二测试线和控制线；所述第一测试线包被了第二抗D-二聚体抗体；所述第二测试线包被了D-二聚体抗原；所述控制线包被了所述测试抗原的抗体。

于本发明的一个实施例中，所述测试抗原为兔IgG；所述测试抗原的抗体为羊抗兔IgG。

于本发明的一个实施例中，所述第一抗D-二聚体抗体和/或所述第二抗D-二聚体抗体为单克隆抗体。

于本发明的一个实施例中，所述量子点-第一抗D-二聚体抗体中的量子点和所述量子点-测试抗原中的量子点为ZnS包被的CdSe纳米颗粒。

于本发明的一个实施例中，所述ZnS包被的CdSe纳米颗粒中CdSe的核心直径为1.8～7.0nm。

第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的D-二聚体量子点荧光检测试剂卡的制备方法，包括如下步骤：1)在玻璃纤维素膜上喷点量子点-第一抗D-二聚体抗体和量子点-测试抗原的混合溶液；2)使用第一预处理液对将要喷点的T1线所对应的硝酸纤维素膜进行第一预处理，并在第一预处理后的硝酸纤维素膜喷点第二抗D-二聚体抗体溶液；3)使用第二预处理液对将要喷点的T2线所对应的硝酸纤维素膜进行第二预处理，并在第二预处理后的硝酸纤维素膜喷点D-二聚体抗原溶液；4)在预设位置的硝酸纤维素膜上喷点测试抗原的抗体溶液。

于本发明的一个实施例中，所述第一预处理液为含有1.5-2g/L精氨酸、1.2-1.5g/L邻苯二甲酸氢钾、0.3-0.5g/L氢氧化钠、2.0-2.5g/L柠檬酸的水溶液。所述第一预处理液的pH为6.0～6.5。

于本发明的一个实施例中，所述第二预处理液为含有2-2.5g/L天冬酰胺、0.5-0.7g/L磷酸氢二钠、3-4g/L鼠李糖、3-3.5g/L甘氨酸的水溶液。所述第一预处理液的pH为7.6～8.0。

第三方面，本发明提供了一种第一方面所述的D-二聚体量子点荧光检测试剂卡在制备D-二聚体检测试剂盒中的用途。

于本发明的一个实施例中，所述用途具体为使用所述D-二聚体检测试剂盒对样品中的D-二聚体抗原进行检测。

第四方面，本发明提供了一种D-二聚体检测试剂盒，包括第一方面所述的D-二聚体量子点荧光检测试剂卡。