[发明专利]采用HPLC-UV-ELSD法检测复方丹参片的方法

说明书

本发明公开了一种采用HPLC‑UV‑ELSD法检测复方丹参片的方法，采用液相色谱梯度洗脱、切换检测波长和紫外检测器串联蒸发光散射检测器的检测方法，对复方丹参片中丹参与三七的特征图谱进行研究。本发明能够对复方丹参片进行全信息的控制，简化了检验过程，节约了分析时间，可用于复方丹参片质量控制及综合评价。

技术领域

本发明涉及中医药检测技术领域，具体是采用HPLC-UV-ELSD法检测复方丹参片的方法。

背景技术

复方丹参片由丹参、三七和冰片组成，具有活血化瘀、理气止痛之功效，是临床治疗冠心病、胸闷和心绞痛的常用中药处方。研究表明，丹参的活性成分主要为二萜醌类脂溶性及丹参酚酸类水溶性成分，具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量等心血管作用及抗肿瘤作用；三七皂苷具有扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板凝集、延长凝血时间、降血脂、清除自由基、抗炎、抗氧化等药理作用。其现行标准为《中国药典》2015年版一部，收载了三七的显微鉴别；薄层鉴别项分别为以丹参酮Ⅱ_A、三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re为对照品，并以冰片和三七为对照药材，鉴别处方中丹参、三七和冰片三味药材；含量测定部分则对丹参的脂溶性成分丹参酮Ⅱ、水溶性成分丹酚酸B以及三七皂苷类成分进行测定。该质量标准不仅检验过程重复繁琐，而且不能全面反映本品在制备过程中成分的变化。研究报道已知的丹参二萜醌类脂溶性成分如二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ，酚酸类水溶性成分如丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B等，三七皂苷类成分如人参皂苷Rd，均未能进行评价。

发明内容

基于此，本发明提供了一种采用HPLC-UV-ELSD法测定复方丹参片的方法，采用液相色谱梯度洗脱、切换检测波长和紫外检测器串联蒸发光散射检测器的检测方法，同时对复方丹参片中丹参与三七的特征图谱进行研究。本发明能够对复方丹参片进行全信息的控制，简化了检验过程，节约了分析时间。

为实现上述技术目的，具体内容如下：

1 、仪器、试剂与样品

（1）仪器：Waters 2695高效液相色谱仪，2487紫外检测器—ALLtech 2000ES蒸发光散射检测器检测；MILLI-PROA纯水处理器；

（2）试剂：丹参素钠对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110855-200508，供含量测定用)、原儿茶醛对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110810-200506，供含量测定用)、迷迭香酸对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号111871-201203，供含量测定用，含量以98.8%计)、丹酚酸B对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号111562-201212，供含量测定用，含量以95.4%计)、二氢丹参酮Ⅰ对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号0868-200103，鉴别用)、隐丹参酮对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110852-200808，供含量测定用，含量以98.7%计)、丹参酮Ⅰ对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110867-200406，鉴别用)、丹参酮Ⅱ_A对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110766-200315，供含量测定用)、三七皂苷R₁对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110745-200617，供含量测定用)、人参皂苷Rg₁对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110703-201128，供含量测定用，含量以93.4%计)、人参皂苷Re对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110754-200822，供含量测定用，含量以88.8%计)、人参皂苷Rb₁对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110704-201122，供含量测定用，含量以92.9%计)、人参皂苷Rd（中国食品药品检定研究院提供，批号110704-201122，供含量测定用，含量以92.9%计)。乙腈为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯；