[发明专利]包含NY‑ESO‑1的微泡、其制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤治疗技术领域，具体涉及一种包含NY-ESO-1的微泡、其制备方法及用途。

背景技术

近年来，肿瘤免疫治疗不断取得新的突破，寻找和鉴定新的肿瘤特异性或相关性抗原是肿瘤免疫学研究的关键之一^[1,2]。癌-睾丸抗原(cancer-testis antigen，CTA)在多种组织来源的肿瘤细胞中表达，但在正常组织中的表达仅限于睾丸和胎盘组织，因此被认为是肿瘤免疫疗法中较理想和最具应用前景的一类靶点^[3]。目前发现的CTA大约有100个^[4]。NY-ESO-1(纽约食管鳞癌蛋白，New York esophageal squamous cell carcinoma-1)，又名CTAG1，是由Chen等使用重组cDNA文库血清学分析技术(serological analysis of recombinant cDNA expression libraries，SEREX)从食管癌cDNA表达文库中筛选出来的一种肿瘤共享抗原^[5]。其编码基因位于X染色体Xq28区，含有180个氨基酸，分子量为18KD，N-端富含甘氨酸，C-端结构极其疏水^[6]。CTA中命名为LAGE-1的蛋白与NY-ESO-1高度同源(84％)^[7]。NY-ESO-1基因家族第3个成员ESO-3 mRNA除去polyA尾全长942bp，编码的蛋白质由143个氨基酸组成，与NY-ESO-1和LAGE-1的氨基酸序列具有中等相似性，尤其是其C端的63个氨基酸，与前二者有着高度一致性^[8]。这类CTA的表达被组蛋白修饰和启动子区的去甲基化所调控，如图1所示^[9]。近期研究表明，低甲基化试剂5-Aza-2'-deoxycytidine(5AZA)和组蛋白去乙酰化抑制剂LBH589可以诱导前列腺癌细胞株中CTA的表达，包括NY-ESO-1、MAGE和SSX家族的成员^[10,11]。

NY-ESO-1的抗体首次在喉管滑膜瘤病人体内发现。此后相继有文献报道，NY-ESO-1在多种肿瘤组织中高表达，包括神经母细胞瘤、滑膜肉瘤、骨髓瘤、黑色素瘤、卵巢癌等，然而在结肠癌、胰腺癌、肾癌、淋巴癌中，NY-ESO-1的表达水平则较低。NY-ESO-1的表达谱如图2所示^[12]。NY-ESO-1被认定为特定种类肿瘤的标志物。较有趣的是，NY-ESO-1在肿瘤中的表达情况也与地域有相关性，比如在美国，约20-25％的非小细胞肺癌患者组织中NY-ESO-1表达阳性，然而在日本非小细胞肺癌患者很少发现NY-ESO-1表达阳性的情况。

尽管NY-ESO-1是一个理想的免疫疗法的靶点，然而其功能却所知甚少。迄今为止，NY-ESO-1没有明显的功能结构域或相互作用蛋白为研究其功能提供线索。在正常细胞中，只有少数几种CTA的功能被报道，他们在减数分裂和顶体装配中起到作用，侧面反映了染色体异常与肿瘤发生的关系^[13,14]。MAGE-1和GAGE可以分别通过TNF-α和Fas起作用，抑制细胞凋亡^[15]。NY-ESO-1的功能没有被充分研究的一个关键因素是在老鼠内没有同源基因，导致没有基因敲除鼠可以利用。在老鼠中，唯一发现的一个相关基因，ESO-3，是一个广泛表达的基因，而不是CTA^[8]。

NY-ESO-1唯一一个保守的特性是其C-端的Pcc-1结构域，它是酵母内一个转录因子的同源物，这个转录因子在细胞周期进程和极化生长中起作用^[16]。有研究报道，NY-ESO-1可以与CTA中的另外一员MAGE-C1相互作用，MAGE-C1主要在细胞周期进程、凋亡及神经遗传疾病中起作用^[17]。由于NY-ESO-1在精原细胞和初级精母细胞中表达，而在精细胞分化过程中表达消失，提示其可能在精细胞自身更新和分化中起作用。