[发明专利]一种EGFP‑CTA2‑TAT融合蛋白在制备荧光探针中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种EGFP-CTA2-TAT融合蛋白在制备荧光探针中的应用。

背景技术

近几十年来，随着一些新的分子识别机理的建立、新型材料的开发与应用以及科技的进步，越来越多的生物荧光探针被发展用于生命科学学科中的基础研究。其研究的对象从均相溶液中的各种离子或分子过渡到生物体内的离子、小分子和生物大分子(酶、核酸、蛋白质等)。科研工作者们除了不断追求具有灵敏度更高、选择性更好的生物荧光探针的构建方法外，更注重将生物荧光探针应用于生物体内重要的信号转导分子的原位检测以及实时监测它们在生命代谢过程中的应激变化。这使得以生物荧光探针为主体的传感器成为研究生命科学工作中的重要工具，它们也极大地推动了生命科学的发展，并有助于研究者们去探索生命过程中的未知领域。已开发且用于检测细胞内目标物的生物荧光探针主要有：基于有机分子荧光探针、核酸或多肽的荧光探针、纳米材料探针以及绿色荧光蛋白探针等。

实验室研究中多功能融合蛋白构建的技术已经相当成熟，EGFP具有绿色荧光、CTA2中含有内质网定位序列KDEL及TAT作为穿膜肽的身份已经众所周知。但是这种利用蛋白融合技术构建的具有良好生物相容性的生物大分子蛋白作为荧光探针的方法目前尚未见报道。

发明内容

为克服现有技术的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种EGFP-CTA2-TAT融合蛋白在制备荧光探针中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种EGFP-CTA2-TAT融合蛋白在制备荧光探针中的应用，所述的EGFP-CTA2-TAT融合蛋白的氨基酸序列如下所示：

MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTLKFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDDGNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIKVNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLLEFVTAAGITLGMDELYKASEFELGGGGSMSNTCDEKTQSLGVKFLDEYQSKVKRQIFSGYQSDIDTHNRIKDELVDGRKKRRQRRRPPQLEHHHHHH

编码所述的EGFP-CTA2-TAT融合蛋白的核苷酸序列如下所示：