[发明专利]一种水溶性维生素E衍生物的高效液相检测方法

说明书

本发明公开了一种水溶性维生素E衍生物的高效液相检测方法，包括如下步骤：S1，配制不同浓度的TPGS单酯、TPGS双酯、α‑生育酚、α‑生育酚琥珀酸酯标准品溶液；S2，配制样品溶液；S3，将S1中的标准品溶液、S2中的样品溶液依次注入液相色谱仪，其中流速为1.0 mL/min，柱温为25～35℃，流动相为乙腈、异丙醇的混合液；本发明水溶性维生素E衍生物的高效液相检测方法不仅能够准确分析TPGS单酯与双酯的含量，还可以检测出TPGS产品中残留的VE及VES含量，便于直观地进行检测和控制产品质量。

技术领域

本发明涉及色谱法检测维生素E含量技术领域，尤其涉及一种水溶性维生素E衍生物的高效液相检测方法。

背景技术

RRR-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯（又称d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯，TPGS）是一种水溶性维生素E衍生物，同时是一种近年来受到广泛关注的、新型PEG羧酸酯，由RRR-α-生育酚琥珀酸酯（VES）和聚乙二醇（PEG1000）发生酯化反应生成，产物是单酯与双酯的混合物。TPGS既含有亲脂性的维生素E结构，又含有亲水性的PEG结构，是一种典型的非离子型表面活性剂。TPGS同时兼具了生育酚与PEG的性质与生理活性。1960年，TPGS被发现可以作为增溶剂使用，随后关于其毒性、安全性的报道相继出现。二十世纪80年代开始使用TPGS来治疗维生素E缺乏症，之后越来越多的研究开始关注TPGS的自身特征和应用，特别是作为吸收促进剂、增溶剂、脂溶性药物的转运载体等应用于药物制剂中，可延长药物在体内的半衰期，改善药物在体内的分布并保护药物不受酶和抗体的攻击。TPGS已是FDA批准的安全药用辅料，可作为增溶剂、乳化剂、吸收促进剂和渗透促进剂应用于药物传递体系。2005年FDA批准了一种治疗尿路上皮癌的Tocosol紫杉醇乳剂，其中TPGS用来提高纳米颗粒的载药量、缩短给药时间、降低毒副作用、提高抗癌效率。目前，TPGS已被广泛地运用于食品、药品及化妆品领域。由于单酯与双酯的物理性质存在差异，所以急需找到能对TPGS定量分析的方法以控制产品质量。

现有文献中TPGS的分析方法可分为两类：一类是间接分析方法，即先将TPGS皂化水解为α-生育酚（VE），通过定量分析TPGS中α-生育酚的含量来评价TPGS；另一类是直接对TPGS进行定性定量分析。

美国药典中TPGS的分析方法为间接分析法。首先，在碱性条件下将TPGS水解为α-生育酚，然后使用气相色谱法（GC）以标准α-生育酚为内标物对TPGS中水解得到的α-生育酚进行定量分析。

另外，还有采用高效液相色谱法（HPLC）间接定量分析TPGS的文献报道。Shen等［Shen MT， et al. Influence of micelle solubilization by tocopherylpolyethylene glycol succinate (TPGS) on solubility enhancement andpercutaneous penetration of estradiol. J. of Controlled Release. 2003. 88(3):p. 355-368.］报道了以维生素E醋酸酯为内标定量分析TPGS皂化后生育酚含量的HPLC方法，所采用的固定相为C8色谱柱，流动相为95/5 (v/v) 的甲醇/10mM 磷酸水溶液，流速为1mL/min，紫外检测器的波长为284nm。Wang等［Wang JY， et al. LC separation andquantification of tocopheryl polyethylene glycol succinate and tocopherylacid succinate in TPGS reaction mixture. J. of Chromatographia. 2009. 70(3-4): p. 551-555］将TPGS在碱性条件下皂化为α-生育酚后，以C18色谱柱为固定相，甲醇为流动相，采用HPLC方法定量分析α-生育酚。