[发明专利]一种鳗败血假单胞菌疫苗及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及水产养殖动物的微生物学及免疫学领域，具体涉及一种鳗败血假单胞菌疫苗及其应用。

背景技术

鳗败血假单胞菌(Pseudomonas anguilliseptica)是海水和半咸水养殖鱼类的重要致病菌。最初在爆发“红点病”的日本鳗鲡(Anguilla japonica)中分离，是革兰氏阴性短杆菌，菌体大小约1μm(直径)×2—3μm(长度)。鳗败血假单胞菌对多种淡水和半咸水鱼类具有致病性，其最适感染温度为17-21℃，在冬季水温较低时发病频繁，在病原假单胞菌中，鳗败血假单胞菌对海水养殖鱼类的威胁最大，已经在多种养殖鱼类中发现了鳗败血假单胞菌感染的病例，包括欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)，黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)，香鱼(Plecoglossus altivelis)，大西洋鲑(Salmo salar)，海鳟(Salmo trutta)，虹鳟(Oncorhynchus mykiss)，白鲑(Coregonus sp.)，大西洋鲱(Clupea harengus)，点带石斑鱼(Epinephelus coioides)，金头鲷seabream(Sparus aurata)，大西洋鳕(Gadus morhua)，大菱鲆(Psetta maxima)和牙鲆 (Paralichthys olivaceus)。该菌呈世界性分布，普遍存在于半咸水和海水环境中，主要分布在法国、西班牙、葡萄牙、苏格兰、芬兰、荷兰、丹麦、日本、韩国等国家和地区，在我国的台湾省也有该病原感染的病例，但大陆地区罕见该病原报道，可能由于该菌在普通培养基上生长十分缓慢，在2216e平板培养基上，鳗败血假单胞菌生长周期为2-4周，不易观察。由于该菌生长代谢速度较慢，且存在胞外荚膜等结构，采用抗生素和化学药物等方法进行预防或治疗效果不明显，反而会带来病原的耐药性、药物残留、食品安全及环境污染等诸多问题，发展疫苗免疫技术为基础的综合防控技术体系将是该病原防治的重要手段。

鳗败血假单胞菌主要存在2种O血清型亚群：来自鳗鱼的菌株及来自金鲷、大菱鲆、海鲷的菌株，RAPD的遗传学将鳗败血假单胞菌分为2种基因型,与2种O抗原血清型一致(López-Romalde et al.2003)。鳗败血假单胞菌的疫苗研究相对较少，只在牙鲆、大菱鲆和海鲷中有过相应的报道，2005 年，西班牙的Romalde等利用鳗败血假单胞菌水化疫苗对大菱鲆进行了免疫， 6周和12周的免疫保护率分别为90％和78％，Romalde等同时进行了海鲷的规模化免疫研究，免疫的海鲷在养成期间死亡率为0.06％，低于未免疫组的 1.42％(Romalde等，2005)。韩国的Jang等制备了鳗败血假单胞菌疫苗对牙鲆进行免疫，在17℃和20℃下，4周的免疫保护率分别为69％和89％(Jang et al.,2014)。目前国际上尚无商品化的鳗败血假单胞菌疫苗产品，且已报道研究所用疫苗皆为灭活菌体的PBS重悬水化疫苗，而商品化灭活疫苗多为油乳化疫苗，水化疫苗由于抗原易降解、疫苗保质期短和免疫保护期短，一般不作为商品化疫苗产品使用。

发明内容

为了解决现有疫苗适配性差稳定性差的问题，我们提出了一种鳗败血假单胞菌疫苗及其应用。

本发明是通过以下技术方案实现的：