[发明专利]固相萃取‑液相色谱‑质谱/质谱法同时测定蜂蜜中烟碱类药物残留量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及蜂蜜中多种烟碱类药物残留量测定的检测方法，尤其涉及一种固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定蜂蜜中多种烟碱类药物残留量的方法。

背景技术

蜂蜜因自身富含多种维生素、矿物质和氨基酸以及人体可直接吸收的单糖(葡萄糖、果糖)等多种类营养物质，且对于便秘、胃和十二指肠溃疡病等都有良好的辅助医疗作用，同时可提高人体免疫力，因此作为一种营养丰富的食品越来越被广大消费者所接受。伴随人民生活水平的提高，对蜂蜜的需求量也不断增加，其质量安全直接关系到人体健康。

烟碱类药物属于一类新型高效、低毒、内吸性强、残效期长、残留量低的广谱性杀虫剂。自20世纪80年代中期第一个烟碱类杀虫剂吡虫啉问世，到目前为止已有十几个产品商品化或即将商品化，如呋虫胺(dinotefuran)、噻虫胺(clothianidin)、吡虫啉(imidacloprid)、啶虫脒(acetamiprid，又名吡虫清)等。其广泛用于水稻、玉米、南瓜等农作物的害虫防治，市场占有率很高。

研究表明烟碱类杀虫剂的作用机制主要是通过选择性控制昆虫神经系统烟碱型乙酰胆碱酯酶受体，阻断昆虫中枢神经系统的正常传导，从而导致害虫出现麻痹进而死亡。它可有效防治同翅目、鞘翅目、双翅目和鳞翅目等害虫，对用传统杀虫剂防治产生抗药性的害虫也有良好的活性，既可有效地防治蔬菜、水稻和果树等各种重要经济作物上发生的蚜虫、粉虱、叶蝉、飞虱、蓟马和蝽等刺吸式害虫以及一些鳞翅目和鞘翅目害虫，也可用于伴侣动物牛寄生虫和卫生害虫如蜚蠊、苍蝇和白蚁的防治。已有研究表明，当蜜蜂接触新烟碱类杀虫剂时，会迷失回巢方向，蜂王繁殖能力显著下降，从而导致蜂群的数量明显减少。

药物的使用使得蜜源植物和蜜蜂体内的药物残留可能导致蜂产品受到污染，从而威胁消费者的身体健康。伴随着人民生活水平、食品安全意识的提高和蜂蜜需求的增加，烟碱类农药在蜂蜜中的残留问题日益突出。为此欧盟法规规定了蜂蜜中新烟碱类农药的最大残留量为：啶虫脒、氟啶虫酰胺和吡虫啉50μg/kg，噻虫胺、呋虫胺、烯啶虫胺和噻虫嗪10μg/kg，噻虫啉200μg/kg。因此建立蜂蜜中烟碱类药物残留量测定的方法，具有重要的科学意义和社会意义。

烟碱类药物作为有效的杀虫剂，其在食品中残留量的测定主要集中在植物源性产品中，目前我国已经制定的植物源性食品中药物残留检测也基本涵盖了烟碱类药物。例如GB/T 19648-2006水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法，GB/T 20769-2008水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法，GB/T 23205-2008茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法等。近几年伴随着烟碱类药物对蜜蜂影响的深入研究，特别是欧盟制定了该类药物的限量以来，研究人员陆续通过液液萃取-分散固相萃取、QuEChERS净化和固相萃取净化等前处理技术，采用高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法对蜂蜜中烟碱类药物残留进行测定，然而尚未检索到蜂蜜中10种烟碱类药物残留在蜂蜜中同时测定的研究报道。为了给蜂蜜产品的质量安全提供必要的技术支持，建立蜂蜜中烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒、噻虫啉、氟啶虫酰胺、氯噻啉和吡呀酮(表1)残留量同时测定的检测方法非常重要。

表1各类化合物的基本信息