[发明专利]一种外切型褐藻胶裂解酶、基因及其应用有效
申请号: | 201710367707.X | 申请日: | 2017-05-23 |
公开(公告)号: | CN107177612B | 公开(公告)日: | 2020-05-22 |
发明(设计)人: | 朱艳冰;郭玉淅;倪辉;肖安风;李利君;姜泽东;杜希萍 | 申请(专利权)人: | 集美大学 |
主分类号: | C12N15/60 | 分类号: | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/00;C12P19/12;C12R1/19 |
代理公司: | 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 | 代理人: | 尤怀成 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 外切 褐藻 裂解 基因 及其 应用 | ||
1.一种编码外切型褐藻胶裂解酶AlgL17的基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一种外切型褐藻胶裂解酶AlgL17,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种褐藻胶裂解酶表达载体,其特征在于:含有如权利要求1所述的褐藻胶裂解酶AlgL17基因的表达载体pET-28a-algl17。
4.一种褐藻胶裂解酶的制备方法,其特征在于:包括采用权利要求3所述的含有褐藻胶裂解酶AlgL17基因的表达载体转化寄主细胞,培养转化体,从培养物中获得重组褐藻胶裂解酶。
5.根据权利要求4所述的一种褐藻胶裂解酶的制备方法,其特征在于:所述的寄主细胞为大肠杆菌。
6.根据权利要求5所述的一种褐藻胶裂解酶的制备方法,其特征在于:包括采用所述的含有褐藻胶裂解酶AlgL17基因的表达载体转化至寄主细胞大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,得到可溶性表达的重组褐藻胶裂解酶。
7.根据权利要求6所述的一种褐藻胶裂解酶的制备方法,其特征在于:所述的IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导温度为18ºC。
8.一种重组褐藻胶裂解酶,其特征在于:包括采用权利要求3所述的含有褐藻胶裂解酶AlgL17基因的表达载体转化寄主细胞,培养转化体,从培养物中获得重组褐藻胶裂解酶。
9.根据权利要求8所述的一种重组褐藻胶裂解酶,其特征在于:该重组褐藻胶裂解酶作用于海藻酸钠底物的最适反应温度和最适反应pH分别为35ºC和8.0;该重组酶在25ºC稳定,在30ºC和35ºC下不稳定,pH的稳定范围为5.0-8.0;钠离子对重组酶活力有激活作用。
10.一种重组褐藻胶裂解酶的应用,其特征在于:该重组褐藻胶裂解酶可作用于海藻酸钠产生DEH,或者该重组褐藻胶裂解酶能直接降解海带,产生还原糖。
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