[发明专利]高羊茅叶片中内生真菌的提取方法在审
| 申请号： | 201710362355.9 | 申请日： | 2017-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN108929856A | 公开（公告）日： | 2018-12-04 |
| 发明（设计）人： | 邵万均 | 申请（专利权）人： | 邵万均 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 叶片 内生真菌 高羊茅 玻璃 菌落 放入 清洗 密封条 次氯酸钠溶液 内生真菌菌株 单独培养 酒精溶液 清水清洗 提取效率 无菌操作 圆形叶片 存活率 培养基 植株 打孔器 接种针 酒精灯 无菌纸 打孔 真菌 暗室 取下 密封 融合 | ||
【权利要求书】：
1.高羊茅叶片中内生真菌的提取方法，其特征在于：包括下述步骤，
(1)将高羊茅植株的叶片取下，在无菌操作台中放置15至20小时；
(2)将叶片放入75％酒精溶液中清洗30至45秒，然后放入0.5％次氯酸钠溶液中清洗10至15秒，使用清水清洗2至3次后放在无菌纸上干燥待用；
(3)将步骤(2)获得的叶片利用打孔器进行打孔，并将获得的圆形叶片放置在玻璃皿的培养基上；
(4)将玻璃皿进行密封，并通过酒精灯将密封条进行融合；
(5)将玻璃皿放置在暗室25摄氏度的环境下培养10至15天，获得内生真菌菌落；
(6)利用接种针将菌落挑出进行单独培养，获得内生真菌菌株。
2.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法，其特征在于：所述的步骤(3)的打孔器通过预先的高温高压灭菌操作。
3.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法，其特征在于：所述的步骤(3)的玻璃皿为直径9厘米的透明玻璃皿。
4.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法，其特征在于：所述的步骤(4)中采用保鲜膜进行玻璃皿的密封。
5.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法，其特征在于：所述的步骤(6)的接种针通过预先的高温高压灭菌操作。
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