[发明专利]口含烟中对羟基苯甲酸酯类物质的测定

说明书

一种口含烟中对羟基苯甲酸酯类物质的测定，其特征在于：采用溶液萃取的方法对样品进行萃取，选取QuECHERS试剂对样品进行净化，通过超高效合相色谱串联质谱技术对样品进行测定。本发明的优点在于：前处理步骤较为简单，所使用的有机溶剂较少；测定过程所使用的有机溶剂量也很少，在3min的时间内可以实现多种成分的测定，测定效率高，相对于液相色谱，此方法检出限低，更适合微量成分的测定，是一种较为绿色、高效、准确的口含烟中对羟基苯甲酸酯类物质的测定方法。

技术领域

本发明属于烟草制品添加剂理化分析领域，具体是一种适用于口含烟中对羟基苯甲酸酯类物质的测定。

背景技术

对羟基苯甲酸酯类物质又称为尼泊尔金酯类物质，包括甲酯，乙酯，丙酯等，是一种广谱，高效防腐剂。目前广泛使用于食品，化妆品，家具，纺织等日化领域，甚至在婴儿用品（如咬咬胶）也检测到它的存在。对羟基苯甲酸酯具有酚羟基结构，在pH3-8的范围内均有较好的抑菌作用。在实际应用中，单独使用一种酯的现象较为少见，多为几种酯的混合使用。

以前，研究认为尼泊尔金酯毒性不大，但是，1998年，Routledge等首次发现了尼泊尔金酯具有雌激素活性，这一发现对尼泊尔金酯具有低毒性的观点提出了挑战；在化妆品领域，最新研究表明，含尼泊尔金酯的膏霜作用于皮肤上后，在紫外线的照射下，会加速皮肤老化，因此，目前很多高端化妆品开始使用别的替代品来进行防腐。

不同于日用品，食品中的尼泊尔金酯类物质是直接进入人体内的。如果过多的食入含有尼泊尔金酯的食物，会导致部分没有被体内组织酶水解成代谢产物——对羟基苯甲酸，而直接被吸收储存在人体组织中，从而造成多种疾病之源。

口含烟是无烟气烟草制品的一种，其主体也是烟草，主要通过口腔含服对其进行吸食。这类产品为了保证口感，含水率较卷烟高，有的甚至加入大量的保润剂保持其湿润状态。如果环境温度较高，极易产生霉菌等腐败物质，因此，产品中会加入一定量的防腐成分。我国目前对于此类防腐剂在食品中的限量在10~1500mg/kg范围内（按照不同的对羟基苯甲酸酯进行分类，且以对羟基苯甲酸盐计）。目前各个国家并没有关于口含烟的成分安全监控系统性文件的颁布，对于其潜在的危险成分（如尼泊尔金酯等防腐剂）检测具有一定的指导意义。

关于尼泊尔金酯类物质的检测，有使用气相色谱质谱联用，液相色谱，液相色谱质谱联用等分析技术。GB/T 5009.31-2003即采用气相色谱进行测定，但是只测定两种酯（甲酯和丙酯），还有的采用气相色谱质谱进行测定，在测定前对其进行衍生化处理，操作较为繁琐。液相色谱及液相色谱串联质谱可以实现尼泊尔金酯类物质的准确测定，但是液相色谱测定中需要使用大量的有机溶剂，对操作者和环境的危害较大。合相色谱是2012年由Waters公司推出的全新色谱技术，其主要的流动相为压缩二氧化碳（CO₂），与液体流动相或载气相比，降低了成本和毒性，且分析速度快，与质谱检测器串联后，可以实现多种成分的准确测定。采用合相色谱串联质谱对口含烟中的尼泊尔金酯类物质进行测定，目前未见相关报道。

发明内容

本发明的目的正是基于上述现有技术状况而提出的一种适用于口含烟中对羟基苯甲酸酯类物质的测定，该方法前处理步骤较为简单，所使用的有机溶剂较少；测定过程所使用的有机溶剂量也很少，在3min的时间内可以实现多种成分的测定，测定效率高。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：采用溶液萃取的方法对样品进行萃取，选取QuECHERS试剂对样品进行净化，通过超高效合相色谱串联质谱技术对样品进行测定，具体步骤如下：

（1）准确称取1g口含烟样品至50mL离心管中，加入内标溶液，再加入10mL甲醇，在超声波中超声提取30min，在离心机中以10000转/分钟的速度离心2min；