[发明专利]一株抗坏血酸克吕沃尔菌及其应用

说明书

一株抗坏血酸克吕沃尔菌及其应用，属微生物技术领域。该菌株已于2017年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC No.13726,分类命名：抗坏血酸克吕沃尔菌Kluyvera ascorbata。本发明菌株是从云南野外紫茎泽兰寄生昆虫泽兰实蝇(Procecidochares utilis Stone)消化道筛分出来的，可在自然环境下快速侵染紫荆泽兰根茎，造成根茎病变，嫩茎、根部腐败，直至植株整株枯死，用于紫茎泽兰的防控，效果好成本低。

技术领域

本发明为微生物技术领域，具体为一株抗坏血酸克吕沃尔菌(Kluyveraascorbata)菌株及其应用。

背景技术

紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum)，菊科泽兰属，多年生草本或亚灌木，能快速形成单优群落，并且会以多种方式抑制其它植物生长，是一种世界性的恶性杂草，也是我国现存危害最大的一种外来植物。由于紫茎泽兰含有多种有毒组分及恶臭组分，仅有泽兰等极少数物种对其有采食现象。近年来虽然人们对紫茎泽兰的治理采取了投放专性天敌、除草剂、植物防控等手段，但均收效甚微。

微生物作为一种高效、安全、无残留的现代农药在现代农业生产及科学研究中有着举足轻重的地位。相应地，针对紫茎泽兰的微生物农药研发也成为近年来紫茎泽兰防治领域的一个主要方向，但由于紫茎泽兰本身含有多种抑菌物质，导致研发工作至今也收效甚微。

发明内容

本发明的目的在于提供一株抗坏血酸克吕沃尔菌及其应用，以该抗坏血酸克吕沃尔菌为活性成分的菌剂用于紫茎泽兰的防控，效果好成本低。

本发明所提供的抗坏血酸克吕沃尔菌(Kluyvera ascorbata)，专利申请人的菌株编号为ZLSY22；该菌株已于2017年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC No.13726,分类命名：抗坏血酸克吕沃尔菌Kluyvera ascorbata。

本发明菌株ZLSY22 CGMCC No.13726的生物学特性为：

LB培养基(LB Medium)培养的菌落为乳白色，圆形隆起，边缘整齐，表面光滑湿润，有臭味；

菌体为小的杆状细胞，0.5～0.7μm×2～3μm，革兰氏阴性，以稀周毛运动。

淀粉水解实验阴性，油脂水解实验阴性，石蕊牛奶实验阳性，尿素实验阴性；发酵葡萄糖可产酸，但不产气；吲哚实验阳性，柠檬酸盐实验阳性，硫化氢实验阴性，V-P阴性，M-R阳性。

本发明菌株是从云南野外紫茎泽兰寄生昆虫泽兰实蝇(Procecidochares utilisStone)消化道筛分出来的。本发明菌株可在自然环境下快速侵染紫荆泽兰根茎，造成根茎病变，嫩茎、根部快速腐败，直至植株整株枯死，是一种具有良好效果及开发研究前景的微生物。

本发明菌株ZLSY22 CGMCC No.13726用于防控紫茎泽兰。

本发明菌株ZLSY22 CGMCC No.13726可以由以下方法分离纯化得到：

泽兰实蝇采自云南农业大学化学楼附近的紫茎泽兰上，将有虫瘿的紫茎泽兰采回实验室。对采回的虫瘿整体消毒后在超净工作台内解剖出幼虫，幼虫用75％酒精漂洗三次，每次两分钟，无菌水漂洗三次后解剖，获得泽兰实蝇消化道。

1.灭菌

所用培养皿、离心管、试管，枪头等实验器材及无菌水均采用高压灭菌，0.1MPa，121℃，灭菌30分钟。

2.研磨