[发明专利]一种1;2;3;4;6- O -五没食子酰葡萄糖分子印迹整体柱的制备方法

说明书

本发明涉及一种1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖分子印迹整体柱的制备方法，该方法以1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖为模板分子，以三元致孔剂N,N‑二甲基甲酰胺、二甲亚砜和1‑丁基‑3‑甲基四氟硼酸盐做溶剂，再加入功能单体、交联剂、金属离子、甲醚甲基丙烯酸酯低聚物以及引发剂，然后超声溶解并充氮气去除溶解氧，在水浴中进行聚合反应，最后得到具有选择性的1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖分子印迹整体柱。本发明所述方法印迹因子大73.9，可用于固相萃取，实现对1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖的特性选择性纯化。该印迹聚合物制备简单，且耐用性好，将其作为固相萃取的填料，为1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖的分离纯化（纯度大于98%）提供了一种有效的方法。

技术领域

本发明涉及一种1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖分子印迹整体柱的制备方法，该印迹聚合物对1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖表现出良好的选择性和特异性，可用于1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖的分离纯化。

背景技术

1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖是一种多酚类单体化合物，具有抗氧化、抗炎、拮抗细胞内毒素、抗癌、治疗糖尿病等多种生物学与药理学活性。因此，1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖在医疗和保健领域具有很好的应用前景。但是，由于1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖在植物中含量较低，若利用传统方法进行提纯分离，费时费力效率低；若采用制备液相色谱进行提纯分离，由于仪器价格昂贵，难于普遍应用。因此，一种高效低廉的提纯分离方法显得尤其重要。目前，1,2,3,4,6-O-五没食子酰基葡萄糖的传统提纯分离方法参考文献引用如下：

文献：利用高速逆流色谱(HSCCC)方法，从白芍中对1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖进行分离纯化。参数设置：以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(0.5:5:1:5，v/v/v/v)和正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(0.5:5:0.5:5，v/v/v/v)混合溶剂作为两相溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，转速＝800rpm，流速＝2.0mL/min，以HPLC和ESI-MS作为验证。实验结果表明：使用HSCCC进行2次分离纯化，得到了纯度为95.7％的1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖。

分子印迹技术是合成具有预定选择性的固定相的新兴技术，它将目标分子作为模板，与功能单体、交联剂、引发剂等混合，在一定条件下发生聚合反应，形成聚合物后再将印迹分子从中抽提洗出，制得分子印迹聚合物(MIP)。MIP对目标分子在三维空间和官能团上具有“记忆”功能。因此，MIP可以特异性的识别目标分子。固相萃取(SPE)是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的分离纯化技术。综上所述，如果将分子印迹技术和固相萃取技术的优点结合，即以分子印迹技术所制得的具有特异性识别能力的分子印迹聚合物作为固相萃取技术的固体吸附剂，完全有可能实现对粗提物中某一目标分子的分离纯化。

已发表的利用分子印迹方法提纯分离1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖的文献引用如下：

文献：采用表面分子印迹方法，以1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖为模板，合成了1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖聚合物。并对该聚合物的吸附性能进行了研究。同时以其作为色谱填料制备色谱柱，成功的从桂枝茯苓胶囊甲醇提取中分离纯化出备1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖。经HPLC检测，其质量分数达90.2％。但是该分子印迹方法所分离纯化出的1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖纯度达不到标准品(纯度大于等于98％)的要求。

发明内容