[发明专利]一种免疫脂质体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种免疫脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)用酶处理西妥昔单抗，得到Fab片段；

(2)将Fab片段与还原剂反应，得到具有单价活性的Fab片段；

(3)将盐酸伊立替康复合磷脂组合物与修饰材料混合，得到具有活化基团的盐酸伊立替康复合磷脂组合物；

(4)将步骤(3)得到的具有活化基团的盐酸伊立替康复合磷脂组合物与步骤(2)得到的具有单价活性的Fab片段混合后反应，得到所述免疫脂质体。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的酶为木瓜蛋白酶和/或胃蛋白酶，优选为木瓜蛋白酶；

优选地，所述酶与西妥昔单抗的质量比为(1-80):1000，优选为(1-50):1000；

优选地，所述酶处理西妥昔单抗的pH为5-7；

优选地，步骤(2)所述的还原剂为2-巯基乙胺·盐酸。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的修饰材料为活化磷脂；

优选地，所述活化磷脂为DSPE-PEG-MAIL、DMPE-PEG-MAIL、DPPE-PEG-MAIL、POPE-PEG-MAIL或DOPE-PEG-MAIL中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述活化磷脂中的聚乙二醇的分子量为1000-5000，优选为2000-5000；

优选地，步骤(4)所述反应的温度为20-30℃；

优选地，步骤(4)所述反应的时间为0-5小时且不包括0点。

4.一种如权利要求1-3中任一项所述的制备方法制备得到的伊立替康脂免疫嵌合西妥昔单抗的免疫脂质体。

5.一种免疫脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1’)用酶处理西妥昔单抗，得到Fab片段；

(2’)将Fab片段与还原剂反应，得到具有单价活性的Fab片段；

(3’)将步骤(2’)得到的具有单价活性的Fab片段与修饰材料反应，得到修饰后的Fab片段；

(4’)将步骤(3’)得到的修饰后的Fab片段与盐酸伊立替康复合磷脂组合物混合后反应，得到所述免疫脂质体。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(1’)所述的酶为木瓜蛋白酶和/或胃蛋白酶，优选为木瓜蛋白酶；

优选地，所述酶与西妥昔单抗的质量比为(1-80):1000，优选为(1-50):1000；

优选地，所述酶处理西妥昔单抗的pH为5-7；

优选地，步骤(2’)所述的还原剂为2-巯基乙胺·盐酸。

7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，步骤(3’)所述的修饰材料为活化磷脂；

优选地，所述活化磷脂为DSPE-PEG-MAIL、DMPE-PEG-MAIL、DPPE-PEG-MAIL、POPE-PEG-MAIL或DOPE-PEG-MAIL中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述活化磷脂中的聚乙二醇的分子量为1000-5000，优选为2000-5000；

优选地，步骤(3’)所述反应的pH为4-8，优选为5-6；

优选地，步骤(4’)所述反应的温度为20-30℃；

优选地，步骤(4’)所述反应的时间为0-5小时且不包括0点。

8.一种如权利要求5-7中任一项所述的制备方法制备得到的伊立替康脂免疫嵌合西妥昔单抗的免疫脂质体。

9.一种如权利要求4或8所述的免疫脂质体用于制备治疗癌症的药物。

10.根据权利要去9所述的用途，其特征在于，所述癌症为结直肠癌，优选为转移性直肠癌。