[发明专利]用于检测肝癌的核酸适配体及检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测肝癌的核酸适配体及检测试剂盒，其中核酸适配体为核酸适配体SW1，核酸适配体SW1的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的DNA片段。本发明的核酸适配体与蛋白抗体相比具有更好的亲和力与特异性；免疫原性小；能够体外化学合成，分子量小，可以对不同部位进行修饰和取代，且化学性质稳定，具有易于保存、便于标记等优势，可用于制备检测肝癌的检测试剂盒。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种用于检测肝癌的核酸适配体及检测试剂盒。

背景技术

核酸适配体(aptamer)是通过指数富集配基的系统进化技术(SELEX)筛选得到的，能特异结合靶物质的单链寡聚核苷酸(单链DNA或RNA)。核酸适体具有与抗体相媲美的亲和力与特异性，而且与抗体相比具有更多的优势，如分子量小，无免疫原性；容易化学合成，成本低；易修饰，且可以对不同部位进行修饰和取代；性质稳定，易于保存等。核酸适体的靶分子更为广泛，包括金属离子、氨基酸、核酸、多肽、蛋白质，并从单一靶标扩展至完整的病毒颗粒及细胞等复合物靶标。因此，核酸适体具有广泛的应用前景。

肝癌是目前发病率及致死率最高的癌症之一，据世界卫生组织统计，2012年全球肝癌新发78.2万例，死亡74.6万例，其中死亡病例数目在所有类型的癌症中排名第二。肝癌主要发生在欠发达地区，特别值得一提的是中国的肝癌发病数约占全球50％，严重危害了国民的身体健康。如果能及早发现、尽早治疗，则癌症的病情往往容易得到控制，降低肝癌发病引起的死亡风险。因此，开发一种更加灵敏、简便、高效和具有特异性的肝癌检测手段，对于肝癌的临床治疗将具有十分重要的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种具有比蛋白抗体更高的亲和力与特异性、无免疫原性、能够化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记的可用于检测检测人临床肝癌组织切片的核酸适体及其衍生物，还提供包括前述核酸适配体的检测试剂盒。

为解决上述技术问题，提供了一种用于检测肝癌的核酸适配体，所述核酸适配体为核酸适配体SW1，所述核酸适配体SW1的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的DNA片段。

上述的用于检测肝癌的核酸适配体，优选的，所述核酸适配体还包括在核酸适配体SW1的核苷酸序列上的某一位置被磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化或同位素化的核酸适配体。

上述的用于检测肝癌的核酸适配体，优选的，所述氨基化具体为在所述核酸适配体SW1核苷酸序列的5’端标记氨基基团-NH₂。

上述的用于检测肝癌的核酸适配体，优选的，所述巯基化具体为在所述核酸适配体SW1核苷酸序列的5’端标记巯基基团-SH。

上述的用于检测肝癌的核酸适配体，优选的，所述核酸适配体的核苷酸序列上结合有生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料或酶标记。

上述的用于检测肝癌的核酸适配体，优选的，所述荧光物质为FAM荧光基团或Cy5荧光基团；所述纳米发光材料为量子点或上转换纳米颗粒；所述酶标记为辣根过氧化物酶或蔗糖酶。

上述的用于检测肝癌的核酸适配体，优选的，所述核酸适配体的核苷酸序列包括以下三种序列中的任意一种；

(1)与所述核酸适配体SW1的核苷酸序列的同源性在60％以上；

(2)与所述核酸适配体SW1的核苷酸序列进行杂交的序列；或者

(3)所述核酸适配体SW1的核苷酸序列转录的RNA序列。

上述的用于检测肝癌的核酸适配体，优选的，所述核酸适配体还包括所述核酸适配体SW1的衍生物，所述衍生物为由所述核酸适配体SW1的核苷酸序列的骨架衍生出的硫代磷酸酯骨架。