[发明专利]一种同时测定中成药中黄曲霉素B1，B2含量的方法

说明书

本发明提供了一种同时测定中成药中黄曲霉素B₁，B₂含量的方法，本发明采用正硅酸乙酯‑3‑氨基丙基三乙氧基硅烷修饰四氧化三铁磁性纳米颗粒作为磁性固相萃取的吸附剂，首次将其使用于黄曲霉毒素B₁，B₂的富集中，具有操作简便、成本低、准确度高等特点；本发明所建立的高灵敏度的磁性纳米颗粒‑高效液相色谱荧光法，对具有复杂物质体系的中成药中黄曲霉毒素B₁，B₂同时进行含量测定研究，具有成本低、选择性高等优点，为更好地保障中药安全性提供了技术支持。

(一)技术领域

本发明涉及一种同时测定黄曲霉素B₁，B₂含量的方法，特别涉及一种同时测定中成药中黄曲霉素B₁，B₂含量的方法。

(二)背景技术

黄曲霉素是一组基本结构为二呋喃环合香豆素的真菌次级代谢产物，常见的黄曲霉素有黄曲霉素B₁(AFB₁)、B₂(AFB₂)、G₁(AFG₁)、G₂(AFG₂)，具有严重的致癌、致畸、致突变等毒副作用。因其剧毒和强致癌性，黄曲霉素成为国内外政府和消费者监管与关注重点。中药的黄曲霉素污染近年来越来越受到国际社会的关注。这是由于中药材种类繁多，种植地区广泛，多数药材在生产、加工、贮藏、运输的过程中，很容易发生霉变而被黄曲霉素污染。而中成药作为中药的主要临床使用形式，尚未有标准对其黄曲霉素的限量进行规定。所以针对中成药建立高灵敏度的黄曲霉素测定方法有着迫切的需求。

磁性固相萃取(MSPE)是一种以磁性材料为吸附剂的样品前处理方法。磁性纳米材料可作为MSPE的吸附剂使用，其优势在于：纳米粒子的比表面积大、扩散距离短，只需使用少量的吸附剂和较短的平衡时间就能实现萃取分离，因此具有较高的萃取能力和萃取效率。 MSPE技术在痕量污染物萃取分离领域已得到了应用，主要集中在对生物样品中代谢产物或金属离子的富集中，但使用在中药中样品前处理的应用研究较少。本课题组已申请的发明专利 201610528482.7功能化磁性纳米材料2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑—(3-巯基丙基)三甲氧基硅烷—磁性纳米颗粒用于中成药生脉饮(党参方)中黄曲霉毒素B₁的富集处理，得到了较为满意的结果。在此基础上，本课题组进一步探索了不同的功能化磁性纳米材料，并将其使用在不同的中成药样品黄曲霉素B₁和B₂的同时测定中，以期通过寻找选择性强的功能化磁性纳米颗粒，对磁性固相萃取的条件进行优化，建立高灵敏度的磁性固相萃取-高效液相色谱-荧光检测的方法用于中成药中黄曲霉素B₁，B₂的含量测定，为中成药黄曲霉素的控制及限量标准的制定提供方法，为更好地保障中药安全性提供了技术支持，为开发一种低成本、高选择性的黄曲霉素样品预处理材料提供依据。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种将磁性纳米颗粒用于同时测定中成药中黄曲霉素B₁，B₂含量的方法，本发明方法具有快速、灵敏、低成本的特点。

本发明采用的技术方案是：

一种同时测定中成药中黄曲霉素B₁，B₂含量的方法，所述的方法为：

(1)制备供试品溶液