[发明专利]一种促进金线莲种子萌发成苗的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物栽培技术领域，进一步涉及兰科植物金线莲种子的萌发诱导技术，具体涉及一种促进金线莲种子萌发成苗的方法。

背景技术

金线莲(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.)属于兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoectochilus)植物，为地生兰。金线莲不仅药用价值高，在民间素有“药王”、“金草”等美誉，同时也是一种极具观赏价值的室内观赏珍品。金线莲种子发育不全，没有胚乳，自然条件下很难独立萌发成苗，再加上近年自然环境遭受严重破坏，鸟、虫、蛇等为害，人工的过度挖掘，使野生金线莲濒临灭绝。

在这种情况下，金线莲的人工培养技术显得尤为重要，而人工培养条件下，种子萌发成苗仍然是整个培养过程的技术瓶颈之一，由于缺乏有效的诱导方法，因此现有技术中金线莲种子的萌发率较低。尽管有研究者进行了大量尝试，但目前仍未取得有效的萌发促进方法，严重制约了金线莲培养技术的规模化应用。

发明内容

本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种促进金线莲种子萌发成苗的方法，以解决现有技术中金线莲种子自然萌发成苗效率低的技术问题。

本发明要解决的另一技术问题是现有技术中缺乏一种促进金线莲种子萌发成苗的人工干预手段。

本发明要解决的再一技术问题是当采用与真菌共生的手段来促进金线莲种子萌发成苗时，缺乏一套有效的真菌获取方法及共生培养条件。

本发明要解决的又一技术问题是当采用与真菌共生的手段来促进金线莲种子萌发成苗时，有效真菌的类别不明确。

为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

一种促进金线莲种子萌发成苗的方法，该方法是从金线莲植株的根部分离真菌，再将所得的真菌与消毒后的金线莲种子在无菌基质中共生培养。

作为优选，所述从金线莲植株的根部分离真菌包括以下步骤：取野生金线莲根，洗净后利用浓度为75％的酒精表面消毒30s，再利用0.1％升汞消毒5min，而后无菌水洗净；将0.5～1cm长度的根段平放在无菌的PDA平板培养基上，封口膜封好后于28℃条件下避光培养；挑取菌落，即为分离得到的真菌。

作为优选，所述从金线莲植株的根部分离真菌包括以下步骤：

1)取野生金线莲根，洗净后利用浓度为75％的酒精表面消毒30s，再利用0.1％升汞消毒5min，而后无菌水洗净；将0.5～1cm长度的根段平放在无菌的PDA平板培养基上，封口膜封好后于28℃条件下避光培养；

2)挑取菌落，通过划线的方法进行纯化，得到若干纯培养的不同种菌落；

3)分别挑取步骤2)所得的不同种菌落，即为若干分离得到的真菌。

作为优选，步骤3)中所挑取的菌落仅有一种，该菌是立枯丝核菌。

作为优选，所述无菌基质中含有木屑。

作为优选，所述无菌基质是通过以下方法制备的：取发酵的木屑基质，加入蒸馏水润湿，分装于培养瓶中灭菌，冷却。

作为优选，所述共生培养的条件为：先于28℃、黑暗条件下培养1周；而后以12h/d的光照时长、2000-2500Lux的光照强度、24～28℃的温度，培养至种子萌发。

本发明提供了一种促进金线莲种子萌发成苗的方法，该技术方案首先通过实验手段发现金线莲种子需与真菌共生才能萌发，在这一思路的指引下，本发明摸索了一套真菌获取方法及共生培养条件，同时明确了一种在木屑基质上对金线莲种子萌发成苗具有突出促进作用的菌株。具体来看，该方法首先从野生金线莲的根中分离得到内生真菌，而后取混生的真菌菌落或纯化的特定菌落与消毒后的金线莲种子在无菌的木屑基质中混合，混合后先在黑暗条件下培养1周，而后以特定的光照时间、光照强度及温度培养，直至种子萌发。该技术方案极大的提升了金线莲种子的萌发速率，同时由于其原理明确因此具有良好的可重复性。本发明为金线莲资源保护和规模化人工培养奠定了坚实的技术基础。

附图说明

图1是本发明实施例1中种子萌发进程图。

具体实施方式

以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。

实施例1

1材料

野生金线莲，购自江西省铜鼓县

2研究方法

2.1内生真菌的获得